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稀释涂布分离大肠杆菌 已有1人参与
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最近在做血红蛋白的抑菌机理实验，需要用到大肠杆菌稀释涂布分离操作 但是对于微生物这一块不是很懂，所以想请教各位虫子。 我遇到的问题如下： 1、怎么计算大肠杆菌原液里的细菌数，原液是放在4℃冰箱里的，要考虑在我检测期间细菌的生长嘛？老师说用血球计数板…… 2、我倒平板进行涂布分离，从10的-7次分离到10的-9次，每次稀释前会振荡摇匀，然后移液枪吸取60μl菌液进行涂布，但平板上总是长成一片，并没有出现30-300个可见的但菌落，求怎么解决以及各位有做过相关实验的虫子的建议。 谢谢。在线等……  |
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2楼2013-09-02 16:16:57
3楼2013-09-02 16:31:04
4楼2013-09-02 16:38:59
mizhoulong
木虫 (著名写手)
环境卫生、微生物学
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牧炀: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢。 我以前经常不注意冷凝的温度，谢谢提醒 2013-09-04 18:06:24
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1.血球计数器，要有一定的微生物实验基础，要有显微镜，放大1000X的油镜， 还有一个简单的方法，就是大肠杆菌军玄烨2（PBS）在600nm吸光度下，OD=1，对应10E9/mL,不过这个不是很准。 2.两个原因，一个是平板上有冷凝水，另一个是菌液浓度很高，看你的情况应该是冷凝器水造成的。 控制冷凝水，琼脂要凉到50度，刚好不凝的时候倒，然后放在安全柜中静置半小时，放到温箱中培养24或48h，一是为了“烘干”冷凝水，二是为了排除污染。 加入60微升菌液，均匀涂布，涂布后静置半小时，倒置于温箱中培养即可。 |
5楼2013-09-03 07:58:28
飘零
木虫 (著名写手)
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6楼2014-06-25 11:16:27