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uzzshadow

银虫 (初入文坛)

[求助] 平板计数法测定肠道菌群

我要做肠道菌群的测定,主要测定肠道各个菌的数量,采用平板计数法,取的肠道内容物怎样保存效果最好,如果放到-20摄氏度的冰箱中会影响实验效果吗?
求解!谢谢!
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caisanrenju

木虫 (正式写手)

不知LZ要测哪几种肠道菌,是好氧菌还是厌氧菌?
如果是厌氧菌,建议不要保存,直接计数。
如果是好氧菌,可以保存,但最好不要-20C,保存后的影响较大。我们实验室的保存方法是:取肠道内容物后,用缓冲蛋白胨水(20%甘油)10倍稀释,震荡均匀后,保存至-80C,30天内菌群变化较小。

PS:LS提出的4C保存方法,只可过夜保存,而且仅限于检测好氧菌

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7楼2011-06-20 17:01:00
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普通回帖

guanhongmin

木虫 (著名写手)

先用缓冲液稀释,后置于0-4度冰箱保存,仅供参考
吾志所向一往无前,愈挫愈勇再接再厉!
2楼2011-06-18 17:56:39
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豆豆菜虫

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

uzzshadow(金币+5): 2011-06-19 00:33:35
引用回帖:
Originally posted by uzzshadow at 2011-06-17 11:12:51:
我要做肠道菌群的测定,主要测定肠道各个菌的数量,采用平板计数法,取的肠道内容物怎样保存效果最好,如果放到-20摄氏度的冰箱中会影响实验效果吗?
求解!谢谢!

应该会吧,因为肠道微生物本身就是温血性的,温度太低的话可能会影响某些不耐冷的菌群,建议是放在保鲜的那层,也就是0~4度得~~~
很多事,不是我想,就能做到的。很多东西,不是我要,就能得到的。
3楼2011-06-18 18:54:41
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uzzshadow

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by guanhongmin at 2011-06-18 17:56:39:
先用缓冲液稀释,后置于0-4度冰箱保存,仅供参考

谢谢了
4楼2011-06-19 00:38:19
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uzzshadow

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 豆豆菜虫 at 2011-06-18 18:54:41:
应该会吧,因为肠道微生物本身就是温血性的,温度太低的话可能会影响某些不耐冷的菌群,建议是放在保鲜的那层,也就是0~4度得~~~

谢谢!!

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5楼2011-06-19 00:38:39
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pinewright

木虫 (初入文坛)

我觉得的话还是取完样品后立刻用缓冲液稀释涂布比较好吧,保存的话菌的数量或多或少都会有变化的吧?
要想精确地定量可以考虑定量pcr~
原来你也唱过我的歌,陪同见证年月的经过
6楼2011-06-20 11:06:09
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uzzshadow

银虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
谢谢,我现在厌氧菌和好氧菌都要做,主要是样品多,工作量大,一次性做不完,要分批次做
8楼2011-06-21 20:17:26
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uzzshadow

银虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by uzzshadow at 2011-06-19 00:38:39:
谢谢!!

谢谢!
9楼2011-06-21 20:32:29
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uzzshadow

银虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by caisanrenju at 2011-06-20 17:01:00:
不知LZ要测哪几种肠道菌,是好氧菌还是厌氧菌?
如果是厌氧菌,建议不要保存,直接计数。
如果是好氧菌,可以保存,但最好不要-20C,保存后的影响较大。我们实验室的保存方法是:取肠道内容物后,用缓冲蛋白胨水 ...

谢谢,我现在厌氧菌和好氧菌都要做,主要是样品多,工作量大,一次性做不完,所以看看能不能有好的保存方法
10楼2011-06-21 20:35:50
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