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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 平板计数法测定肠道菌群
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uzzshadow

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by pinewright at 2011-06-20 11:06:09:
我觉得的话还是取完样品后立刻用缓冲液稀释涂布比较好吧，保存的话菌的数量或多或少都会有变化的吧？
要想精确地定量可以考虑定量pcr~

问一下，如果样品放久了，还可以用定量pcr吗？对实验结果影响大吗？
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11楼2011-06-22 11:01:51
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uzzshadow

银虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by caisanrenju at 2011-06-20 17:01:00:
不知LZ要测哪几种肠道菌，是好氧菌还是厌氧菌？
如果是厌氧菌，建议不要保存，直接计数。
如果是好氧菌，可以保存，但最好不要-20C，保存后的影响较大。我们实验室的保存方法是：取肠道内容物后，用缓冲蛋白胨水 ...

问一下如果用定量pcr做的话，样品保存时间长的话对结果影响大吗？
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12楼2011-06-22 11:04:29
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caisanrenju

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by uzzshadow at 2011-06-22 11:04:29:
问一下如果用定量pcr做的话，样品保存时间长的话对结果影响大吗？

粪便最好立即提取DNA，完全不要保存，无论什么条件。提完DNA你可以放在冰箱什么时候做都可以。
我之前都是这么操作的。
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13楼2011-06-22 19:22:37
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pinewright

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by caisanrenju at 2011-06-22 19:22:37:
粪便最好立即提取DNA，完全不要保存，无论什么条件。提完DNA你可以放在冰箱什么时候做都可以。
我之前都是这么操作的。

赞同，DNA保存起来方便，又能表达原位的信息
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原来你也唱过我的歌，陪同见证年月的经过
14楼2011-06-23 09:27:00
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学
对微生物进行计数，要想获得活细菌计数，最好是尽快做，越快越好，任何保存方式都会造成数量上的变化。

如果仅仅了解细菌总数，不管死活，也应该先提取细菌DNA，然后保存在-80，用Q-PCR慢慢做，就不着急了。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
15楼2012-12-11 08:02:00
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zoeye

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by caisanrenju at 2011-06-20 17:01:00
不知LZ要测哪几种肠道菌，是好氧菌还是厌氧菌？
如果是厌氧菌，建议不要保存，直接计数。
如果是好氧菌，可以保存，但最好不要-20C，保存后的影响较大。我们实验室的保存方法是：取肠道内容物后，用缓冲蛋白胨水（ ...

请问什么是缓冲蛋白胨水？
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16楼2013-12-19 15:29:24
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