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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌培养问题
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sunhan

木虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌培养问题 已有4人参与

我将从斜面管中用接种环取出一环大肠杆菌置于装有液体培养基的离心管中，放在摇床中培养（37度，150转/分），由于把离心管盖上了，培养了一夜之后发现并没有菌体生长。
1，大肠杆菌是兼性厌氧细菌，理论上在无氧或少氧条件下应该可以生长，但是这次却没有生长，请问是什么原因？
2，培养条件中，摇床转速会对培养有影响吗？文献中有的说是250转/分。
3，问一个其他的问题，紫外线可以杀菌，但是为什么不用紫外线代替高温灭菌？
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Leteverythinggo,stickonmyroad.
1楼 2014-01-11 15:58:55
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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sunhan: 金币+1 2014-01-12 18:40:08
是不是加错抗生素了。摇床转速150转可以了。紫外线虽然可以杀菌但其穿透力较差，一般隔层玻璃就弱很多，灭菌不彻底，有时会引发菌体变异。不如高温灭菌彻底，使一切都死亡。
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hehe
2楼2014-01-11 20:09:02
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sunhan

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-01-11 20:09:02
是不是加错抗生素了。摇床转速150转可以了。紫外线虽然可以杀菌但其穿透力较差，一般隔层玻璃就弱很多，灭菌不彻底，有时会引发菌体变异。不如高温灭菌彻底，使一切都死亡。

我没有加抗生素，只是把离心管的盖子不小心盖上了，放了一夜没什么动静，不知道为什么大肠杆菌不长，要达到菌体成为絮状，可以最后离心分离不知道需要多少菌？
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Leteverythinggo,stickonmyroad.
3楼2014-01-12 18:41:43
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青铜时代

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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可能原因：
1）斜面在冰箱保存太久，菌已过分老化了
2）接种环过热，挑的菌已被高温杀死
3）菌并非没有长，而是没有超过10的7次方cfu/ml水平（要知道菌的浓度在10的6次方以下，你凭肉眼是判断不出是否长菌的），因此看起来还是澄清透明的，如是这种情况，你可拧松盖子后继续培养，直至其浑浊
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4楼2014-01-13 01:10:36
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青铜时代

新虫 (小有名气)
紫外线只能杀物体表面的细菌，穿透力极差，一般不能透过管壁杀菌
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5楼2014-01-13 01:11:51
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青铜时代

新虫 (小有名气)
至于转速，静置培养一晚，只要菌活力正常，照样长起来。因此不是问题关键
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6楼2014-01-13 01:13:24
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laray

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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我是加了抗生素，按千分之一的比例加的，一般取5ml的LB，想快点的话就250RPM，想一般就200RPM，长得很好的
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南无阿弥陀佛
7楼2014-01-13 14:53:10
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肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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sunhan: 金币+4, ★★★★★最佳答案 2014-01-14 14:23:25
盖上盖子没问题，可以长出来。
建议：离心管太小，培养液在里面不容易晃动，可以在里面放在无菌的小枪头之类的增加晃动；或者用试管吧，最好用
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8楼2014-01-13 21:54:53
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zeroon

木虫 (正式写手)
紫外线。。。诱变育种不有用紫外线的。何况器材什么的总有不能完全暴露在紫外线下的，随便一个小角落没有紫外线照到，不是没法灭菌了
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9楼2014-01-13 22:36:03
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sunhan

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 肥猫p at 2014-01-13 21:54:53
盖上盖子没问题，可以长出来。
建议：离心管太小，培养液在里面不容易晃动，可以在里面放在无菌的小枪头之类的增加晃动；或者用试管吧，最好用

我的离心管里除了菌还有其他的物质，但是如果静置一段时间就沉降下去了，在摇床里离心管里的培养液不容易晃动，等拿出来的时候加进去的材料又沉淀了，请问有什么解决办法比较好？
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Leteverythinggo,stickonmyroad.
10楼2014-01-14 14:25:29
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