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天空的蓝铜虫 (小有名气)
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[求助]
异硫氰酸胍提取DNA 已有4人参与
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| 刚开始做细菌分子实验，请问哪位大神能告诉我异硫氰酸胍与DNA、RNA的作用机理吗？它作为提取DNA的药剂有什么好坏呢？实在不懂，希望不吝赐教，谢谢~~~~ |
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4楼2018-08-24 08:54:10
红卫大兵
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
天空的蓝(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励热心回帖交流 2015-01-24 20:46:48
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1.异硫氰酸胍消化液 异硫氰酸胍4mol/L 柠檬酸钠(PH7.0)25mmol/L 十二烷基肌酸钠0.5% β-巯基乙醇0.1mol/L 2.消化方法：用50～100ul细胞悬液及血清，加等体积的异硫氰酸胍消化液振混匀后，或65℃1小时，或室温放置数分钟，然后加1/10体积的3mmol/LpH5.2的醋酸钠缓冲液，再加等体积的酚：氯仿，用力振摇约10s，10000r/min，离心5min，取上清加等体积异丙醇-20℃放置3h后，14000r/min离心15min，沉定用75%冰冷乙醇离心洗涤1～2次，真空干燥，沉淀用TE缓冲液溶解即可用于逆转录PCR扩增，或放-20℃保存。 |
2楼2015-01-24 18:44:59
3楼2015-08-21 13:18:27