应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 异硫氰酸胍提取DNA
61/1返回列表
查看: 6747  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

天空的蓝

铜虫 (小有名气)

[求助] 异硫氰酸胍提取DNA 已有4人参与

刚开始做细菌分子实验，请问哪位大神能告诉我异硫氰酸胍与DNA、RNA的作用机理吗？它作为提取DNA的药剂有什么好坏呢？实在不懂，希望不吝赐教，谢谢~~~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
专心，专注，专业。与大家一起成长，进步！
1楼 2015-01-24 16:21:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
天空的蓝(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励热心回帖交流 2015-01-24 20:46:48
1.异硫氰酸胍消化液

异硫氰酸胍4mol/L

柠檬酸钠(PH7.0)25mmol/L

十二烷基肌酸钠0.5%

β-巯基乙醇0.1mol/L

2.消化方法：用50～100ul细胞悬液及血清，加等体积的异硫氰酸胍消化液振混匀后，或65℃1小时，或室温放置数分钟，然后加1/10体积的3mmol/LpH5.2的醋酸钠缓冲液，再加等体积的酚：氯仿，用力振摇约10s，10000r/min，离心5min，取上清加等体积异丙醇-20℃放置3h后，14000r/min离心15min，沉定用75%冰冷乙醇离心洗涤1～2次，真空干燥，沉淀用TE缓冲液溶解即可用于逆转录PCR扩增，或放-20℃保存。
赞一下 回复此楼
2楼2015-01-24 18:44:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

碧雪凡

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

异硫氰酸胍是强蛋白变性剂，对于RNA而言，高浓度胍盐和其他试剂合用能够快速抑制RNA酶活性，避免RNA被降解。
还有如果你是用柱子提取，现在的硅胶膜都会提到一定浓度的胍盐能够使得DNA被硅胶膜吸附，因此除去杂质。
赞一下 回复此楼
3楼2015-08-21 13:18:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mew10086

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

异硫氰酸胍-酚法提取RNA的原理：异硫氰酸胍和b-巯基乙醇共同作用抑制RNase的活性，同时异硫氰酸胍和十二烷基肌氨酸钠共同作用是使蛋白质变性，从而释放RNA；在酸性条件下DNA极少发生解离，同蛋白质一起变性被沉淀下来，而RNA溶于上清中。
异硫氰酸胍的毒性：吸入，摄入，皮肤接触异硫氰酸胍均可造成损伤，所以操作时需穿好实验服，戴好手套和护目镜；其与酸接触可释放极高毒性气体，对水生生物有害，可能对水体环境产生长期不良影响，因此应避免释放至环境中。
赞一下 回复此楼
4楼2018-08-24 08:54:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

格林化工

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

内容已删除
赞一下 回复此楼
5楼2020-10-09 09:50:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

格林化工

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

内容已删除
赞一下 回复此楼
6楼2020-10-10 12:09:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 天空的蓝 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭