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静待天享

金虫 (小有名气)

[求助] ELISA相关问题 已有4人参与

做了几次试验,结果都不理想,吸光值很低,都在0.045左右,加入底物之后溶液变成蓝色,加中止液后变成黄色,变成蓝色后颜色是还有一次递增的趋势,加完中止液后黄色都特别接近。求赐教!!!1
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静待天享

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2015-01-18 11:17:17
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂; 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。 解决办法: 1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流; ...

您好!我想问一下在做ELISA实验中,我选择了以前试剂盒中的标准品用,抗体是自己包被的,一抗、二抗都是自己包被的,实验结果是标准品和样品吸光值都没有梯度,都在2.8、2.7、3.0左右。不知道是什么原因?
5楼2015-01-27 15:11:18
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是溶液不好使了,或者没混匀啊。
2楼2015-01-18 10:17:15
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2015-01-18 15:07:32
静待天享: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢! 2015-01-26 15:20:46
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂; 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。 解决办法: 1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流; 3) A、B液应避免接触金属器械。 6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。 7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
3楼2015-01-18 11:17:17
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
静待天享: 金币+5, 有帮助, 谢谢! 2015-01-26 15:21:07
你是说做的标准曲线吧,本底太高了,拉开的距离较小。
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
4楼2015-01-22 14:12:14
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