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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】血清Elisa相关问题
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apple-z

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】血清Elisa相关问题 已有4人参与

我要做Elisa来检测免疫后小鼠血清中的抗体，由于抗原为自己表达纯化的蛋白，故而不能用商业化的试剂盒操作，需要自己包被板子，自己做。
我现在有些问题想咨询下各位：

1. 空白对照该如何设计？我查了一些试剂盒的说明书，其中空白对照的设置不大相同，我想知道像我的这种情况，采用哪种空白对照的设计更为科学合理。

2. 阴性对照，我打算用PBS免疫（对照）组的小鼠血清作为检测疫苗免疫组小鼠血清抗体Elisa时的隐形对照，不知这样合适吗？

3. 还有阳性对照，我有必要设计阳性对照吗？如有，该如何设计？

希望各位大侠给出宝贵意见。在此先行谢过了。
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1楼 2010-06-25 16:00:36
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apple-z

银虫 (小有名气)
各位 有熟悉相关内容的 给个建议啊 谢过了
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2楼2010-06-26 14:35:52
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ff1983

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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amisking(金币+2):good！ 2010-06-26 19:16:54
1.空白对照可以使用酶稀释液
2.阳性对照没必要做的
3.你应该是测抗体的效价吧!
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3楼2010-06-26 16:06:36
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yaojc

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2):good！ 2010-06-26 19:17:03
同意楼上的说法，间接法测效价，将抗体作为样本倍比稀释后加入，将酶标抗鼠二抗按一定浓度进行稀释，检测A450nm值，以吸光度值是阴性对照2倍的浓度作为效价
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专注、专心、专业
4楼2010-06-26 17:23:21
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apple-z

银虫 (小有名气)
是要测血清中抗体的滴度（或说是测其效价），不知道阴性对照如何设计更为合理。
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5楼2010-06-29 10:46:34
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cheo163

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
阴性对照就用未免疫过的小鼠血清就好了~~
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6楼2010-06-29 11:16:59
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