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【求助/交流】血清Elisa相关问题
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【求助/交流】血清Elisa相关问题
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我要做Elisa来检测免疫后小鼠血清中的抗体,由于抗原为自己表达纯化的蛋白,故而不能用商业化的试剂盒操作,需要自己包被板子,自己做。
我现在有些问题想咨询下各位:
1. 空白对照该如何设计?我查了一些试剂盒的说明书,其中空白对照的设置不大相同,我想知道像我的这种情况,采用哪种空白对照的设计更为科学合理。
2. 阴性对照,我打算用PBS免疫(对照)组的小鼠血清作为检测疫苗免疫组小鼠血清抗体Elisa时的隐形对照,不知这样合适吗?
3. 还有阳性对照,我有必要设计阳性对照吗?如有,该如何设计?
希望各位大侠给出宝贵意见。在此先行谢过了。
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1楼
2010-06-25 16:00:36
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各位 有熟悉相关内容的 给个建议啊 谢过了
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2010-06-26 14:35:52
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amisking(金币+2):good! 2010-06-26 19:16:54
1.空白对照可以使用酶稀释液
2.阳性对照没必要做的
3.你应该是测抗体的效价吧!
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3楼
2010-06-26 16:06:36
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amisking(金币+2):good! 2010-06-26 19:17:03
同意楼上的说法,间接法测效价,将抗体作为样本倍比稀释后加入,将酶标抗鼠二抗按一定浓度进行稀释,检测A450nm值,以吸光度值是阴性对照2倍的浓度作为效价
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4楼
2010-06-26 17:23:21
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是要测血清中抗体的滴度(或说是测其效价),不知道阴性对照如何设计更为合理。
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5楼
2010-06-29 10:46:34
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阴性对照就用未免疫过的小鼠血清就好了~~
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6楼
2010-06-29 11:16:59
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