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apple-z

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】血清Elisa相关问题 已有4人参与

我要做Elisa来检测免疫后小鼠血清中的抗体,由于抗原为自己表达纯化的蛋白,故而不能用商业化的试剂盒操作,需要自己包被板子,自己做。
我现在有些问题想咨询下各位:

1. 空白对照该如何设计?我查了一些试剂盒的说明书,其中空白对照的设置不大相同,我想知道像我的这种情况,采用哪种空白对照的设计更为科学合理。

2. 阴性对照,我打算用PBS免疫(对照)组的小鼠血清作为检测疫苗免疫组小鼠血清抗体Elisa时的隐形对照,不知这样合适吗?

3. 还有阳性对照,我有必要设计阳性对照吗?如有,该如何设计?

希望各位大侠给出宝贵意见。在此先行谢过了。
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apple-z

银虫 (小有名气)

各位 有熟悉相关内容的 给个建议啊 谢过了
2楼2010-06-26 14:35:52
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ff1983

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
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amisking(金币+2):good! 2010-06-26 19:16:54
1.空白对照可以使用酶稀释液
2.阳性对照没必要做的
3.你应该是测抗体的效价吧!
3楼2010-06-26 16:06:36
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yaojc

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
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amisking(金币+2):good! 2010-06-26 19:17:03
同意楼上的说法,间接法测效价,将抗体作为样本倍比稀释后加入,将酶标抗鼠二抗按一定浓度进行稀释,检测A450nm值,以吸光度值是阴性对照2倍的浓度作为效价
专注、专心、专业
4楼2010-06-26 17:23:21
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apple-z

银虫 (小有名气)

是要测血清中抗体的滴度(或说是测其效价),不知道阴性对照如何设计更为合理。
5楼2010-06-29 10:46:34
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cheo163

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
阴性对照就用未免疫过的小鼠血清就好了~~
6楼2010-06-29 11:16:59
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