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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 肽类物质液相色谱分析问题
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476210038

新虫 (初入文坛)

[求助] 肽类物质液相色谱分析问题 已有2人参与

刚开始测试样品时，标准曲线线性良好，过段时间相同样品再次进样时始终做不出线性好的标线，物质保留时间为2.14左右，每针进样6 min, 经常在5 min左右出一个很大很大的峰，而2.14时没有峰，不知为什么，尤其低浓度时。冲了柱子仍然不好用，保护柱滤芯刚刚换过，什么原因呢？求高手指点。
液相条件是等度洗脱，乙腈：水=70：30
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1楼 2015-01-06 22:06:06
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
7楼: Originally posted by 476210038 at 2015-01-06 22:50:16
但是等度洗脱过去一直走的挺好的，同一样品前几天还能做出好的线性结果，过几天就这样了，最近怎么都重复不出来...

一开始一帆风顺是有不明物质残留累积的典型特征，可能性最高，所以做出这样的猜测。你用异丙醇多冲冲柱子。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
8楼2015-01-06 22:54:42
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普通回帖

archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
样品是单一成分吗？
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2015-01-06 22:08:01
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shamzh

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
476210038: 金币+1 2015-01-07 09:27:20
如果样品没问题的话，会不会时间过长，有机流动相成份降低啦？流动相怎么混合的？
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珍惜时间，提高效率
3楼2015-01-06 22:20:51
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476210038

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shamzh at 2015-01-06 22:20:51
如果样品没问题的话，会不会时间过长，有机流动相成份降低啦？流动相怎么混合的？

用了两个流动相，一个是单纯水，一个时乙腈。流动相使用前均会换新的
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4楼2015-01-06 22:30:58
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476210038

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by archbishop at 2015-01-06 22:08:01
样品是单一成分吗？

是单一成分，一共测试了两种肽样品，有一种含有Al,含Al的标线线性不是很好，但是至少出峰正常，而这个单独的肽样品就总是有问题，经常在后面出很大的峰，而且即使正常出峰，有时到四分钟左右也开始出一个很大的峰或者在四分钟时基线往上飘
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5楼2015-01-06 22:34:30
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by 476210038 at 2015-01-06 22:34:30
是单一成分，一共测试了两种肽样品，有一种含有Al,含Al的标线线性不是很好，但是至少出峰正常，而这个单独的肽样品就总是有问题，经常在后面出很大的峰，而且即使正常出峰，有时到四分钟左右也开始出一个很大的峰或 ...

我建议你试试梯度洗脱，可能是有等度走不出来的东西。至于是怎么产生的就不清楚了，只是猜测。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
6楼2015-01-06 22:42:23
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476210038

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by archbishop at 2015-01-06 22:42:23
我建议你试试梯度洗脱，可能是有等度走不出来的东西。至于是怎么产生的就不清楚了，只是猜测。...

但是等度洗脱过去一直走的挺好的，同一样品前几天还能做出好的线性结果，过几天就这样了，最近怎么都重复不出来
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7楼2015-01-06 22:50:16
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476210038

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by archbishop at 2015-01-06 22:54:42
一开始一帆风顺是有不明物质残留累积的典型特征，可能性最高，所以做出这样的猜测。你用异丙醇多冲冲柱子。...

用异丙醇冲过柱子后（水（0.1%甲酸）：乙腈：甲醇：异丙醇=1：1：1：1），整个基线全漂移了，很斜，我用有机相冲了很久，又用我要用的水：乙腈=70：30冲了好久都不行，怎么回事呢
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9楼2015-01-07 20:31:14
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
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9楼: Originally posted by 476210038 at 2015-01-07 20:31:14
用异丙醇冲过柱子后（水（0.1%甲酸）：乙腈：甲醇：异丙醇=1：1：1：1），整个基线全漂移了，很斜，我用有机相冲了很久，又用我要用的水：乙腈=70：30冲了好久都不行，怎么回事呢...

你用的什么色谱柱
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
10楼2015-01-07 21:24:14
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