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liling0207

新虫 (初入文坛)

[求助] 糖肽类大分子物质 HPLC 已有5人参与

糖肽类大分子物质,分子量1800左右,HPLC分析时,用的是磷酸二氢钾 25mM,pH7.0 但是峰形前延又拖尾,大家有什么建议没?
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liling0207

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
23楼: Originally posted by springsheep at 2014-09-25 01:37:44
那就是你的缓冲盐,不合适,可能生成复合物,所以前沿!...

嗯,应该是的,现在换成其他盐了,峰基本上已经正了
24楼2014-09-25 08:23:45
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普通回帖

liling0207

新虫 (初入文坛)

谢谢!
2楼2014-09-16 12:08:46
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zgx3876

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上样量少点。还不行的话有可能是柱子老了。如果只是一部分峰宽,有可能没洗干净,或者样品不纯就这样
3楼2014-09-16 13:26:15
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liling0207

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zgx3876 at 2014-09-16 13:26:15
上样量少点。还不行的话有可能是柱子老了。如果只是一部分峰宽,有可能没洗干净,或者样品不纯就这样

新柱子也是前延拖尾比较厉害,用纯乙腈的话,分型会好看很多,但是我的样品时多组分的,极性与分子量很接近,乙腈就分不开,加点甲醇,峰又开始歪了,不知道你能给点建议不?
4楼2014-09-17 12:29:12
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

请问用的是什么柱子?应该是色谱柱不适合吧 糖肽类的样品检测可以考虑一下糖基柱吧 同时使用ELSD检测器
归零
5楼2014-09-17 15:29:15
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zgx3876

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by liling0207 at 2014-09-17 12:29:12
新柱子也是前延拖尾比较厉害,用纯乙腈的话,分型会好看很多,但是我的样品时多组分的,极性与分子量很接近,乙腈就分不开,加点甲醇,峰又开始歪了,不知道你能给点建议不?...

我也不是很专业,不过如果只是想把样品分开,可以做梯度的HPLC吧?加0.05%~0.1%的TFA

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-09-17 18:50:43
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xushubo

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可不可也先看下图!再说
7楼2014-09-18 15:11:46
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暮色圆月

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该是柱子问题,可用糖基柱或凝胶柱等等
8楼2014-09-19 14:58:08
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puretech

铜虫 (初入文坛)

是特拉万星?或者达巴万星?
9楼2014-09-19 21:40:23
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liling0207

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by klicking at 2014-09-17 15:29:15
请问用的是什么柱子?应该是色谱柱不适合吧 糖肽类的样品检测可以考虑一下糖基柱吧 同时使用ELSD检测器

我用的是普通的C18柱,目前用的是Waters的cortects C18+,可以分离,加了点三乙胺峰是不拖尾了,但前延问题还是没有解决
10楼2014-09-22 12:21:52
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