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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 糖肽类大分子物质 HPLC
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liling0207

新虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by zgx3876 at 2014-09-17 18:50:43
我也不是很专业，不过如果只是想把样品分开，可以做梯度的HPLC吧？加0.05%～0.1%的TFA
...

一直都是梯度，三氟乙酸不适合我的样品
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11楼2014-09-22 12:22:38
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liling0207

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by 暮色圆月 at 2014-09-19 14:58:08
应该是柱子问题，可用糖基柱或凝胶柱等等

目前没有试过糖基柱，问了不同公司的工程师，没有推荐用糖基柱的
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12楼2014-09-22 12:23:54
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liling0207

新虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by puretech at 2014-09-19 21:40:23
是特拉万星？或者达巴万星？

后者
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13楼2014-09-22 12:24:09
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liling0207

新虫 (初入文坛)
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7楼: Originally posted by xushubo at 2014-09-18 15:11:46
可不可也先看下图！再说

嗯，流动相是：A   20mM 的 KH2PO4 pH2.5
                      B 乙腈-甲醇  75：25
梯度是：0~5min  5%~30%  5~30min  30%~34%  30~40min 34%~70%
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14楼2014-09-22 12:33:50
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liling0207

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xushubo at 2014-09-18 15:11:46
可不可也先看下图！再说

我现在用的是Waters 的cortects C18+ 2.7um的色谱柱
流动相：A 磷酸盐  pH 2.5
             B 乙腈-甲醇  75：25
梯度：0-5min 5%-30%  5-30min  30%-34%  30-40min  34-70%
色谱图如下：
糖肽类大分子物质 HPLC
无标题.png
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15楼2014-09-22 12:44:09
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klicking

至尊木虫 (著名写手)
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10楼: Originally posted by liling0207 at 2014-09-22 12:21:52
我用的是普通的C18柱，目前用的是Waters的cortects C18+，可以分离，加了点三乙胺峰是不拖尾了，但前延问题还是没有解决...

试过离子对试剂没？
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16楼2014-09-22 17:13:58
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springsheep

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

前延问题，可能是你的样品溶剂问题，你进样前，用啥溶剂溶的你的样品？如果是反向柱，注意增大极性
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17楼2014-09-23 00:46:16
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liling0207

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by springsheep at 2014-09-23 00:46:16
前延问题，可能是你的样品溶剂问题，你进样前，用啥溶剂溶的你的样品？如果是反向柱，注意增大极性

这个也已经考察过了，用流动相溶解也还是前延
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18楼2014-09-23 10:36:43
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liling0207

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by klicking at 2014-09-22 17:13:58
试过离子对试剂没？...

没有，觉得尽量能不用就不用
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19楼2014-09-23 10:41:50
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klicking

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by liling0207 at 2014-09-23 10:41:50
没有，觉得尽量能不用就不用...

嗯嗯 这倒是 我现在也没招了 只能根据你自己做的实际情况来见招拆招了 我做液相也才两年 好多问题也一直困扰着我 祝你早点解决问题
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20楼2014-09-23 21:15:52
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