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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 用HPLC分离多肽，如何根据多肽来选择不同的柱子呢？C4/C8/C18
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奋发-言午

银虫 (小有名气)

[求助] 用HPLC分离多肽，如何根据多肽来选择不同的柱子呢？C4/C8/C18 已有2人参与

求大虾们指点啊！
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1楼 2013-09-04 09:47:02
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奋发-言午

银虫 (小有名气)
顶
2楼2013-09-04 10:15:16
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
suruiqin: 金币+1, 辛苦了，鼓励交流，欢迎常来分析版~ 2013-09-04 12:43:12
一般用C18就够了，但是要注意填料的孔径。
小分子多肽用100A左右的填料，大分子的要用300A的填料。
C8的保留比C18弱，其他性质都差不多。
记得在流动相里加0.1%的TFA，改善峰型的。
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3楼2013-09-04 10:17:32
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dela

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

C4，C8，C18主要就是保留能力和稳定性的区别。
保留能力和稳定性随着烷基长度的增加而增强。比如：C4就可以分离在C18上保留过强的物质。
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4楼2013-09-10 10:07:27
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swallow13

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
5楼2013-09-10 18:42:49
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sky10016

木虫 (著名写手)
C18 啊 ， 基本上是通用的柱子，可分析检测大如多肽类物质，同样可以检测小分子。如果是多肽流动相建议考虑乙腈和水系统，TFA 0.05%。基本上可以搞定。
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方寸间，历数世上桑田沧海；时空里，细问人间暑往寒来；是朋友，星移斗转情不改；是知音，天涯海角记心怀。
6楼2013-09-10 21:13:58
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

根据分子量大小来选择，一般C18柱作为通用柱对大多多肽都适用，对于一些酸性、碱性甚至难溶性肽可能还要用到PLRP柱。
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悲催的研发！
7楼2013-09-11 08:49:38
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mingge

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.根据分子量判断孔径的选择，分子量大的选择300A孔径（比较常用）；2.根据蛋白的极性和电荷判断流动相，一般尽量使用水相流动相，适当改变PH值来优化条件。
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Q1454596160
8楼2013-10-09 11:14:55
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mojianchou

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼上基本都对。如果你有这么多柱子可以做对比试验。
我也就用过C18，其他公司都没有提供过。
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9楼2015-02-09 13:38:05
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

如果是买新柱，建议C4或C8，300A的。如果只能在现有柱子里找，那就拿标样走走试试，哪个出峰漂亮用哪个。注意除了很短的肽以外有机相不要加太多，以免沉淀。一般60%左右顶天了。

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10楼2015-02-09 14:40:15
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