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奋发-言午

银虫 (小有名气)

[求助] 用HPLC分离多肽,如何根据多肽来选择不同的柱子呢?C4/C8/C18 已有2人参与

求大虾们指点啊!
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奋发-言午

银虫 (小有名气)

2楼2013-09-04 10:15:16
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
suruiqin: 金币+1, 辛苦了,鼓励交流,欢迎常来分析版~ 2013-09-04 12:43:12
一般用C18就够了,但是要注意填料的孔径。
小分子多肽用100A左右的填料,大分子的要用300A的填料。
C8的保留比C18弱,其他性质都差不多。
记得在流动相里加0.1%的TFA,改善峰型的。
3楼2013-09-04 10:17:32
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dela

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

C4,C8,C18主要就是保留能力和稳定性的区别。
保留能力和稳定性随着烷基长度的增加而增强。比如:C4就可以分离在C18上保留过强的物质。
4楼2013-09-10 10:07:27
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swallow13

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2013-09-10 18:42:49
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sky10016

木虫 (著名写手)

C18 啊 , 基本上是通用的柱子,可分析检测大如多肽类物质,同样可以检测小分子。如果是多肽流动相建议考虑乙腈和水系统,TFA 0.05%。基本上可以搞定。
方寸间,历数世上桑田沧海;时空里,细问人间暑往寒来;是朋友,星移斗转情不改;是知音,天涯海角记心怀。
6楼2013-09-10 21:13:58
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

根据分子量大小来选择,一般C18柱作为通用柱对大多多肽都适用,对于一些酸性、碱性甚至难溶性肽可能还要用到PLRP柱。
悲催的研发!
7楼2013-09-11 08:49:38
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mingge

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.根据分子量判断孔径的选择,分子量大的选择300A孔径(比较常用);2.根据蛋白的极性和电荷判断流动相,一般尽量使用水相流动相,适当改变PH值来优化条件。
Q1454596160
8楼2013-10-09 11:14:55
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mojianchou

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

楼上基本都对。如果你有这么多柱子可以做对比试验。
我也就用过C18,其他公司都没有提供过。
9楼2015-02-09 13:38:05
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

如果是买新柱,建议C4或C8,300A的。如果只能在现有柱子里找,那就拿标样走走试试,哪个出峰漂亮用哪个。注意除了很短的肽以外有机相不要加太多,以免沉淀。一般60%左右顶天了。

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-02-09 14:40:15
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