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guyutian

新虫 (初入文坛)

[求助] 分离分子量400~550的四种物质,怎么选葡聚糖凝胶?

我现在做纯化,先用大孔树脂AB-8做过初分,再细分想分离4种分子量在400~550的物质,其中三种分别是410多、420多和430多,是不是应该用葡聚糖凝胶?我查了 SephadexG-10  分离范围<700 适用于脱盐、 肽与其它小分子 的分离。那我是不是应该用
SephadexG-10  ? 可是三种的分子量很接近,能分开么?我看到有别人在别的问题里回答说“在收集的时候一般是2ml左右就可以换,这样接出来的样品纯的可能性大”,我是不是也应该2mL接一管?有什么好办法?另外,柱子怎么选择?

谢谢!!

本人极品实验室小白一枚!做实验全考文献+木虫。
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gsli1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢参与! 2012-10-29 08:54:24
你可以试一下了,不一定能分开,因为太近了,你可以流速控制慢一些,至于接的体积数,应该根据情况自己再顶
每个人都生来孤独
2楼2012-10-29 08:30:21
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syuchenj

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 3Q 2012-11-28 22:19:16
葡聚糖凝胶压根就不可能分得出啊,这几个东西的分子量差别太小了。
得换系统:
比如如果你的体系极性不同,换极性柱
如果HPLC可以的话,也许制备液相可以帮助你
或者模拟移动床也可以帮助你
3楼2012-10-29 18:41:51
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guyutian

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by syuchenj at 2012-10-29 18:41:51
葡聚糖凝胶压根就不可能分得出啊,这几个东西的分子量差别太小了。
得换系统:
比如如果你的体系极性不同,换极性柱
如果HPLC可以的话,也许制备液相可以帮助你
或者模拟移动床也可以帮助你

谢谢!能稍微详细解释一下液相那块儿么?我是要用液相呢,C18柱
4楼2012-11-01 13:45:58
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玉剑蓝

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这么接近 除非是很长的柱子 不然一般都会一起下了吧 还是老老实实用硅胶柱什么分吧~
5楼2012-11-27 23:35:40
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磺达肝葵钠

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


karl2100: 金币+1, 多谢提供! 2012-11-28 22:19:33
纯化我做一年多了,葡聚糖凝胶除盐效果很好,柱子最好选择细长的,如果很接近的分子量那你的葡聚糖凝胶的型号不好选,可以考虑极性大小来上层析柱。之前我用SephadexG-25,单分子量没有你遇到的那么接近,你可以试试。
6楼2012-11-28 20:05:29
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lhg0209asd

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看你的分子量凝胶柱如果是分离同类成分不会有什么效果,如果结构有明显差异还是有希望的。比如400分量的三萜母核和其562的糖就有可能分离,糖先下
7楼2012-11-29 08:47:51
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