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christina016

至尊木虫 (文坛精英)


[交流] 【求助】悬赏(急):求教葡聚糖凝胶的选择!!

我的情况如下:
(1)目标分子是水溶性的,分子量1600-2000之间,杂质为水溶性盐类,分子量100以下,我的目的是除盐
(2)曾试过G-25,交叉出来的组分很多,得到的纯品很少
(3)打算尝试G-10或G-15中的一种,不知道应该选择哪一种?
(4)我每次的待分离粗品大约有200-300mg,应该使用多少量的葡聚糖凝胶(按溶胀前的克数计算)呢?
(5)我以前基本没怎么用过这类东西,使用上还望各位高人指点一下,谢谢!
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chfpl_1

金虫 (著名写手)



karl2100(金币+1): 谢谢您的建议! 2011-01-16 20:31:32
christina016(金币+1): 2011-01-17 16:19:33
建议用G-10,效果好一点,

层析柱粗细必须均匀,柱管大小可根据试剂需要选择。一般来说,细长的柱分离效果较好。若样品量多,最好选用内径较粗的柱,但此时分离效果稍差。柱管内径太小时,会发生“管壁效应”,即柱管中心部分的组份移动慢,而管壁周围的移动快。柱越长,分离效果越好,但柱过长,实验时间长,样品稀释度大,分离效果反而不好。

    对于脱盐的柱一般都是短而粗,柱长(L)/直径(D)<10;对分级分离用的柱,L/D值可以比较大,对很难分离的组份可以达到L/D=100,一般选用内径为1cm,柱长100cm就够了。
2楼2011-01-16 15:44:58
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henghuibio

新虫 (小有名气)


christina016(金币+1): 2011-05-20 08:33:17
G-10好一些。

凝胶过滤上样量一般为5%的柱床体积。建议初次上样1-2%,视分离情况再调整。脱盐时上样量可打20%柱床体积。脱盐时,柱长/直径比 一般5:1即可。

干胶用量/g=πr2h/溶胀度(床体积/g干胶)
考虑到凝胶在处理过程中会有部分损失,用上式计算得出的干胶用量应再增加10%-20%

希望对你有帮助!有机会合作,嘿嘿。
3楼2011-01-25 13:41:48
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liu200479

木虫 (正式写手)


christina016(金币+1): 2011-05-20 08:33:11
4楼2011-03-23 00:01:09
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