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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】葡聚糖凝胶层析 流速变小
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qyl6123

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】葡聚糖凝胶层析 流速变小 已有2人参与

我正在做葡聚糖凝胶层析纯化肌球蛋白，用的是Sephadex-G100，但是不知道什么原因流速越来越慢，刚开始收集的几管还是设定的体积，可是后来每管的体积越来越少，各位高人，谁能帮我解答一下呀，有奖哦！
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1楼 2009-12-16 09:32:09
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WXY00

银虫 (小有名气)
qyl6123(金币+1):呵呵，已经解决了，谢谢！ 2010-04-01 11:13
是不是你用的柱子下面有筛板的，因为凝胶的是非常细的颗粒会不会是柱子堵住了
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2楼2010-03-24 18:31:34
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l_inhumain

金虫 (小有名气)
qyl6123(金币+1):嘻嘻，这么久了还有人回复，谢谢建议哦，我的问题已经解决了，是层析柱本身的问题 2010-04-01 11:12
你是自己装的柱子还是买的预装柱？如果是预装柱很可能是堵住了，如果是自己手动装的柱子，应该用流动相先跑上一段时间，让凝胶堆积好，到凝胶体积稳定了，跑个蓝色葡聚糖看看装柱的效果，再上你的样品。
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3楼2010-03-24 18:54:36
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luckychenq

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
谢谢楼上哦，我也有这个问题要问呵呵
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4楼2010-05-25 13:06:47
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若水寒星

新虫 (初入文坛)
像这种葡聚糖凝胶层析柱一般都是自己装的吧，至少我都自己装，干凝胶采用热法溶胀处理，湿法装柱，装好的层析柱应立即与平衡液连接，在适宜操作压下，控制流速，用2到3倍柱体积的平衡液流过固定相，使其达到平衡。这时层析柱中基质应符合填装均匀、松紧一致和没有气泡的标准，如果看不出来效果，可以跑个蓝色葡聚糖看看
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5楼2010-05-27 16:34:03
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