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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 葡聚糖凝胶层析,流速过慢

大家都是怎么做葡聚糖凝胶层析的啊??我选用的G-100的葡聚糖凝胶,用蒸馏水煮沸2h溶胀后,装柱,自然沉降,结果流速很慢,大概5--6秒一滴,这个正常吗?凝胶是脱过气的,是不是我哪里操作有误?请高手指教!!!!
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): Good! 2011-06-18 22:15:40
liuliancy(金币+3): 非常感谢!!! 2011-06-19 09:00:59
内径和体积多大?一分钟多少流速?出水管大小不同,一滴的体积也不同,要测过不加压力的情况下,就是自然流过柱,要多久才能有1毫升,或者规范的说是一分钟多少毫升。我的内径1.6厘米,体积30毫升的自装柱,流速为0.8-1毫升每分钟。GE的预装柱一般推荐流速也差不多是1毫升每分钟,不会超过3的。除非是脱盐柱,50毫升的体积的,可以达到15毫升每分钟。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-06-18 20:17:49
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4, EPI+1): 很好 2011-06-19 12:15:58
liuliancy(金币+2): 2011-06-20 09:53:09
稍微慢了点,凝胶柱填料也不是很刚性的,如果太重底部的凝胶会有点变形,流速就会慢一些。半径一厘米,那高就是不到40厘米,我怀疑高了一些。但是也可以做一次,因为一般一个半柱床体积之后就什么东西都出来了,照0.5毫升每分钟来算也只要一个半小时而已。高一些,分离得可能好一些。如果矮一些,分离效果可能会差一些,流速快一些也没有什么意义。先别有心理负担,做一次看效果如何。

我还觉得似乎两个小时用来溶胀稍微短了些,不过也无所谓了。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-06-18 22:50:28
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-06-18 22:50:28:
稍微慢了点,凝胶柱填料也不是很刚性的,如果太重底部的凝胶会有点变形,流速就会慢一些。半径一厘米,那高就是不到40厘米,我怀疑高了一些。但是也可以做一次,因为一般一个半柱床体积之后就什么东西都出来了,照 ...

好的,明白了,我试试!!!!超感谢!!!!
5楼2011-06-19 09:02:23
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普通回帖

liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-06-18 20:17:49:
内径和体积多大?一分钟多少流速?出水管大小不同,一滴的体积也不同,要测过不加压力的情况下,就是自然流过柱,要多久才能有1毫升,或者规范的说是一分钟多少毫升。我的内径1.6厘米,体积30毫升的自装柱,流速为 ...

内径1cm体积也是30ml,刚测了下,不加压一分钟大概0.5ml,正常吗??
3楼2011-06-18 20:52:44
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cxuemin

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

liuliancy(金币+2): 确实啊!!慢的牙疼...到后来0.5都没了,难道没有别的办法吗?? 2011-06-19 19:34:28
注意一下,静水压问题,越到后越慢,0.5mL属于正常
6楼2011-06-19 16:31:47
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菲菲姐1988

银虫 (正式写手)

正常的,今天我才做了实验,导师说4-6滴每秒钟很好
7楼2011-10-30 16:52:19
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lingde_h

铁虫 (初入文坛)

西瓜: , 可以发个新帖哦 2012-03-18 17:38:52
引用回帖:
1335314楼: Originally posted by cxuemin at 2011-06-19 16:31:47:
注意一下,静水压问题,越到后越慢,0.5mL属于正常

请问大虾,我是新手刚接触凝胶过滤,装的是G150,1.6*30cm,流速非常之慢呀,而且感觉流出的液体里有凝胶珠子,很是头疼,该怎么办?PS:用的是商品柱,两端是红色的,下端有网状筛板。
敬请指教,谢谢!!
8楼2012-03-18 15:49:35
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lingde_h

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
1308513楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-06-18 20:17:49:
内径和体积多大?一分钟多少流速?出水管大小不同,一滴的体积也不同,要测过不加压力的情况下,就是自然流过柱,要多久才能有1毫升,或者规范的说是一分钟多少毫升。我的内径1.6厘米,体积30毫升的自装柱,流速为 ...

大侠,你好,新虫想请教下:我装了个60ml 的柱子,内径1.6cm,高30cm,柱材料为G-150。可是流速很慢,自然流速2小时才10ml。之前有用蠕动泵来加入液体后来下端开始漏凝胶,倒出来才发现下面的筛板破了。
请问G-150的这个自然流速正常吗?不正常这是为什么呀?用蠕动泵可下端流速又跟不上柱内压力就会很大了,该怎么解决?
谢谢~~
9楼2012-03-19 13:47:49
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
2374104楼: Originally posted by lingde_h at 2012-03-19 13:47:49:
大侠,你好,新虫想请教下:我装了个60ml 的柱子,内径1.6cm,高30cm,柱材料为G-150。可是流速很慢,自然流速2小时才10ml。之前有用蠕动泵来加入液体后来下端开始漏凝胶,倒出来才发现下面的筛板破了。
请问G- ...

我觉得很慢,但是哪里出问题就不知道了,可能是填料有点堵。

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10楼2012-03-19 14:25:38
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