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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 【求助】有关葡聚糖凝胶的问题
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lwsfirst

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】有关葡聚糖凝胶的问题 已有4人参与

为什么我的柱子灌好上样后再离心会塌下去？装柱时我用四千转离心20分钟，而且是慢慢的装的，每次都用四千转离心20min，应该装的很实了！是凝胶的问题吗？
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1楼 2010-01-23 21:12:55
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biowandy

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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wtf66(金币+2):谢谢参与 1-24 13:32
你为什么要离心，凝胶基本是有韧性的颗粒，灌注的时候松散，下沉很正常。一般不离心的时候，使用一段时间也会自己下沉很多。  你离心那么结实干嘛？  太结实了容易导致流速变慢的。有那个必要吗？    下沉是绝对的， 不错下沉的高度应该和凝胶质量有关。
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2楼2010-01-24 13:16:31
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ljg

金虫 (小有名气)
★ ★
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wtf66(金币+1):我们是让其自己沉淀 1-24 13:43
确实不用离心的啊  装好后可以多用几倍溶剂流洗就压紧了
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3楼2010-01-24 13:35:01
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lwsfirst

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ljg at 2010-1-24 13:35:
确实不用离心的啊  装好后可以多用几倍溶剂流洗就压紧了

离心会有什么结果啊？
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4楼2010-01-24 21:36:16
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长生基因

木虫 (初入文坛)
★ ★
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junjun517(金币+1):谢谢回帖交流 1-25 10:43
常规的凝胶装填应该是不离心的，需要按一定的流速清洗就可以获得需要的柱效！
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5楼2010-01-25 10:41:27
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lwsfirst

新虫 (小有名气)
我用的是微柱离心法，不离心不成。。。。。
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6楼2010-01-25 11:46:03
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biowandy

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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笨笨猪0608(金币+2):谢谢参与交流 1-26 08:15
甭管什么方法，离心的我也见过，做亲和层析，如果是小管子的柱子，过柱子很麻烦，不好操作，也可以离心。   离心来得更快，这个可以理解。

但是我没见过非亲和层析柱也使用这个离心的方法，  如果是亲和柱离心后如果担心产物没有挂柱完全，可以吧过滤液体再次上柱，继续离心二次。

就是不知道你这个是什么类型的柱子，
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7楼2010-01-25 21:24:08
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lwsfirst

新虫 (小有名气)
我用的g25葡聚糖凝胶，一毫升的注射管
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8楼2010-01-26 11:02:20
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biosep

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
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笨笨猪0608(金币+1):谢谢参与交流 1-26 14:36
G系列胶本来就很软，不能离心的
你是用作脱盐还是分子排阻？离心后色谱性能就不一样了
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9楼2010-01-26 14:18:18
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biowandy

木虫 (正式写手)
★ ★
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笨笨猪0608(金币+1):谢谢参与 1-27 08:10
引用回帖:
Originally posted by lwsfirst at 2010-01-26 11:02:20:
我用的g25葡聚糖凝胶，一毫升的注射管

g25是脱盐的专用柱子，这种柱子为啥要离心呢？ 很纳闷？

按照分子大小分离的，离心的话，感觉怪怪的。

人家protocol说要这么干吗？

这种柱子离心绝对绝对会不断压缩体积，至于压缩到什么程度，没研究过，

你是要这个柱子脱盐还是分离很小的分子啊？
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10楼2010-01-26 19:13:56
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