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lwsfirst

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】有关葡聚糖凝胶的问题 已有4人参与

为什么我的柱子灌好上样后再离心会塌下去?装柱时我用四千转离心20分钟,而且是慢慢的装的,每次都用四千转离心20min,应该装的很实了!是凝胶的问题吗?
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biowandy

木虫 (正式写手)

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wtf66(金币+2):谢谢参与 1-24 13:32
你为什么要离心,凝胶基本是有韧性的颗粒,灌注的时候松散,下沉很正常。一般不离心的时候,使用一段时间也会自己下沉很多。  你离心那么结实干嘛?  太结实了容易导致流速变慢的。有那个必要吗?    下沉是绝对的, 不错下沉的高度应该和凝胶质量有关。
2楼2010-01-24 13:16:31
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ljg

金虫 (小有名气)

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wtf66(金币+1):我们是让其自己沉淀 1-24 13:43
确实不用离心的啊  装好后可以多用几倍溶剂流洗就压紧了
3楼2010-01-24 13:35:01
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lwsfirst

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ljg at 2010-1-24 13:35:
确实不用离心的啊  装好后可以多用几倍溶剂流洗就压紧了

离心会有什么结果啊?
4楼2010-01-24 21:36:16
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长生基因

木虫 (初入文坛)

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junjun517(金币+1):谢谢回帖交流 1-25 10:43
常规的凝胶装填应该是不离心的,需要按一定的流速清洗就可以获得需要的柱效!
5楼2010-01-25 10:41:27
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lwsfirst

新虫 (小有名气)

我用的是微柱离心法,不离心不成。。。。。
6楼2010-01-25 11:46:03
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biowandy

木虫 (正式写手)

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笨笨猪0608(金币+2):谢谢参与交流 1-26 08:15
甭管什么方法,离心的我也见过,做亲和层析,如果是小管子的柱子,过柱子很麻烦,不好操作,也可以离心。   离心来得更快,这个可以理解。

但是我没见过非亲和层析柱也使用这个离心的方法,  如果是亲和柱离心后如果担心产物没有挂柱完全,可以吧过滤液体再次上柱,继续离心二次。

就是不知道你这个是什么类型的柱子,
7楼2010-01-25 21:24:08
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lwsfirst

新虫 (小有名气)

我用的g25葡聚糖凝胶,一毫升的注射管
8楼2010-01-26 11:02:20
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biosep

至尊木虫 (著名写手)

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笨笨猪0608(金币+1):谢谢参与交流 1-26 14:36
G系列胶本来就很软,不能离心的
你是用作脱盐还是分子排阻?离心后色谱性能就不一样了
9楼2010-01-26 14:18:18
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biowandy

木虫 (正式写手)

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笨笨猪0608(金币+1):谢谢参与 1-27 08:10
引用回帖:
Originally posted by lwsfirst at 2010-01-26 11:02:20:
我用的g25葡聚糖凝胶,一毫升的注射管

g25是脱盐的专用柱子,这种柱子为啥要离心呢? 很纳闷?

按照分子大小分离的,离心的话,感觉怪怪的。

人家protocol说要这么干吗?

这种柱子离心绝对绝对会不断压缩体积,至于压缩到什么程度,没研究过,

你是要这个柱子脱盐还是分离很小的分子啊?
10楼2010-01-26 19:13:56
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