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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 糖肽类大分子物质 HPLC
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liling0207

新虫 (初入文坛)

[求助] 糖肽类大分子物质 HPLC 已有5人参与

糖肽类大分子物质，分子量1800左右，HPLC分析时，用的是磷酸二氢钾 25mM，pH7.0 但是峰形前延又拖尾，大家有什么建议没？
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1楼 2014-09-16 10:47:00
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liling0207

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
23楼: Originally posted by springsheep at 2014-09-25 01:37:44
那就是你的缓冲盐，不合适，可能生成复合物，所以前沿！...

嗯，应该是的，现在换成其他盐了，峰基本上已经正了
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24楼2014-09-25 08:23:45
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普通回帖

liling0207

新虫 (初入文坛)
谢谢！
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2楼2014-09-16 12:08:46
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zgx3876

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上样量少点。还不行的话有可能是柱子老了。如果只是一部分峰宽，有可能没洗干净，或者样品不纯就这样
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3楼2014-09-16 13:26:15
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liling0207

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zgx3876 at 2014-09-16 13:26:15
上样量少点。还不行的话有可能是柱子老了。如果只是一部分峰宽，有可能没洗干净，或者样品不纯就这样

新柱子也是前延拖尾比较厉害，用纯乙腈的话，分型会好看很多，但是我的样品时多组分的，极性与分子量很接近，乙腈就分不开，加点甲醇，峰又开始歪了，不知道你能给点建议不？
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4楼2014-09-17 12:29:12
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klicking

至尊木虫 (著名写手)
请问用的是什么柱子？应该是色谱柱不适合吧 糖肽类的样品检测可以考虑一下糖基柱吧 同时使用ELSD检测器
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归零
5楼2014-09-17 15:29:15
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zgx3876

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by liling0207 at 2014-09-17 12:29:12
新柱子也是前延拖尾比较厉害，用纯乙腈的话，分型会好看很多，但是我的样品时多组分的，极性与分子量很接近，乙腈就分不开，加点甲醇，峰又开始歪了，不知道你能给点建议不？...

我也不是很专业，不过如果只是想把样品分开，可以做梯度的HPLC吧？加0.05%～0.1%的TFA

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2014-09-17 18:50:43
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xushubo

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可不可也先看下图！再说
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7楼2014-09-18 15:11:46
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暮色圆月

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该是柱子问题，可用糖基柱或凝胶柱等等
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8楼2014-09-19 14:58:08
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puretech

铜虫 (初入文坛)
是特拉万星？或者达巴万星？
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9楼2014-09-19 21:40:23
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liling0207

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by klicking at 2014-09-17 15:29:15
请问用的是什么柱子？应该是色谱柱不适合吧 糖肽类的样品检测可以考虑一下糖基柱吧 同时使用ELSD检测器

我用的是普通的C18柱，目前用的是Waters的cortects C18+，可以分离，加了点三乙胺峰是不拖尾了，但前延问题还是没有解决
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10楼2014-09-22 12:21:52
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