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liling0207

新虫 (初入文坛)

[求助] 糖肽类大分子物质 HPLC 已有5人参与

糖肽类大分子物质,分子量1800左右,HPLC分析时,用的是磷酸二氢钾 25mM,pH7.0 但是峰形前延又拖尾,大家有什么建议没?
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zgx3876

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上样量少点。还不行的话有可能是柱子老了。如果只是一部分峰宽,有可能没洗干净,或者样品不纯就这样
3楼2014-09-16 13:26:15
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liling0207

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zgx3876 at 2014-09-16 13:26:15
上样量少点。还不行的话有可能是柱子老了。如果只是一部分峰宽,有可能没洗干净,或者样品不纯就这样

新柱子也是前延拖尾比较厉害,用纯乙腈的话,分型会好看很多,但是我的样品时多组分的,极性与分子量很接近,乙腈就分不开,加点甲醇,峰又开始歪了,不知道你能给点建议不?
4楼2014-09-17 12:29:12
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

请问用的是什么柱子?应该是色谱柱不适合吧 糖肽类的样品检测可以考虑一下糖基柱吧 同时使用ELSD检测器
归零
5楼2014-09-17 15:29:15
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zgx3876

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by liling0207 at 2014-09-17 12:29:12
新柱子也是前延拖尾比较厉害,用纯乙腈的话,分型会好看很多,但是我的样品时多组分的,极性与分子量很接近,乙腈就分不开,加点甲醇,峰又开始歪了,不知道你能给点建议不?...

我也不是很专业,不过如果只是想把样品分开,可以做梯度的HPLC吧?加0.05%~0.1%的TFA

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-09-17 18:50:43
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