24小时热门版块排行榜    

查看: 1266  |  回复: 7

王雪松_

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCR操作中的问题 已有3人参与

各位好,我以前没有做过PCR,现在做了很长时间,操作已经非常熟练,但却一直做不出来,老师用同样的引物同样的材料能做出来,我实在找不到问题出在什么地方,十分的着急!!希望经验丰富的朋友帮忙找找问题出在哪儿!十分感谢!  有时候做出来有几条带,我确定模板引物都加到位了,体系用的mix那种操作起来也简单了一点。跑电泳应该没有什么问题吧,每次MARK都有的。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangleigsn

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
王雪松_: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢啊,但是老师却能做出来,应该是我自己操作的问题,不是试剂的问题 2015-01-04 09:17:39
用控制变量做对照,我有一次老是做不出来,最后用别人扩增效果好的~一全套引物,模板。包括酶,dntp, buffer.每次变一个量,最后查出来是高保真聚合酶的问题,我当时就醉了!

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-01-04 08:42:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-01-07 16:39:44
应该考虑一下酶的问题,没有条带,是否是引物或模板降解了哦 如果不是,那就是酶的问题了
推荐Relia热启动Taq酶 谢谢 http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-01-07 11:02:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

titus0805

铁虫 (小有名气)

要是别人能做出来你做不出来,那就只有两个字,手潮
这个是无解的
4楼2015-01-07 11:14:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雪松_

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-01-07 11:02:32
应该考虑一下酶的问题,没有条带,是否是引物或模板降解了哦 如果不是,那就是酶的问题了
推荐Relia热启动Taq酶 谢谢 http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html

我也觉得是,,捉急
5楼2015-01-07 15:53:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

引用回帖:
5楼: Originally posted by 王雪松_ at 2015-01-07 15:53:00
我也觉得是,,捉急...

加油哦,功夫不负有心人呐 肯定会做出来的  呵呵
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
6楼2015-01-08 09:05:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
王雪松_: 金币+2, 谢谢 2015-01-20 09:35:21
王雪松_: 金币+3, 谢谢 2015-01-20 09:35:39
引用回帖:
5楼: Originally posted by 王雪松_ at 2015-01-07 15:53:00
我也觉得是,,捉急...

你好好琢磨琢磨,如果模板引物真的确定没有降解的话,那就换一种酶(最好是热启动的酶),结果应该会好的,祝你成功哦!
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
7楼2015-01-08 09:10:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肚糠稀同学

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这种问题经常发生 是正常的  首先要接受这个事实  另外 如果模版没有问题 你用的是mix 那么问题一定在酶上 下次换一个新的  没开封的酶试一试呢
8楼2015-01-08 10:17:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王雪松_ 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 11:51 by xiangy672
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见