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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » Real Time PCR 问题
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hakkie

新虫 (初入文坛)

[求助] Real Time PCR 问题

最近做Real-Time，有三个基因，其中一个扩增曲线呈现直线型而非S型（见附件图），扩增完后解链温度73度，而且峰值处的荧光值比其他两个明显低。我觉得是引物二聚体的原因，所以把引物浓度从500nM调到100nM，结果没什么变化，反倒最后扩增产物的荧光值更高了（产物更多）。我想是不是引物自身形成发夹结构导致的？？这个引物确实有发夹结构，自身弯曲后有三个互补碱基，不知道这样分析对不对，是否还有其他什么解释？？还望高手解答！

Real Time  PCR 问题
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Real Time  PCR 问题-1
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1楼 2014-12-08 22:15:40
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