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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC梯度洗脱问题
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海浪016

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC梯度洗脱问题 已有1人参与

我的样品是用梯度洗脱来进行HPLC分析的，梯度洗脱流动相A为磷酸二氢胺缓冲液，流动相B为色谱乙腈。今天在进行分析时，看到流动相B的色谱乙腈快用完了就加了点乙腈，但是在下一阵分析时样品的出峰时间由之前的30min，变为了16min左右，其他什么的都没有动过，请教各位虫友，为什么出峰时间会提前，而且提前了这么多？
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1楼 2014-12-02 17:56:57
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海浪016

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liwentao2010 at 2014-12-03 08:25:54
主要原因可能不是添加乙腈引起的，楼主看看柱压是否有变化，若是不稳定，可能添加乙腈时进入气泡到仪器内了。

柱压是正常的。就出峰时间提前了很多。 我也怀疑过气泡进入了仪器，通过重新排空，然后打样，出峰时间还是提前很多。
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9楼2014-12-03 09:12:57
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
可能是因为乙腈太少了，在你加乙腈之前就有气泡进到了管路里。
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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
2楼2014-12-02 19:56:53
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海浪016

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by archbishop at 2014-12-02 19:56:53
可能是因为乙腈太少了，在你加乙腈之前就有气泡进到了管路里。

加乙腈之前还是比较多的，液位是漫过流动相的管子的。

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3楼2014-12-02 23:10:23
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主
★ ★ ★
费姚永芬: 金币+3, 辛苦了，谢谢交流 2014-12-03 08:59:27
引用回帖:
3楼: Originally posted by 海浪016 at 2014-12-02 23:10:23
加乙腈之前还是比较多的，液位是漫过流动相的管子的。
...

后面的样品也都提前了吗？
按说不会出现这种情况，我也常这么干，即使是不是同一个牌子的乙腈，不脱气直接倒也不会影响保留时间。

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雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。
4楼2014-12-03 02:18:31
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