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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 基线很不稳定怎么回事？
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jinglh8288

木虫 (正式写手)

[求助] HPLC 基线很不稳定怎么回事？

最近利用HPLC走流动相空白发现在220nm下检测，基线很不稳定，最初维持在0附近，几分钟后基线就升到上百个单位，为一个大峰包，随后又迅速下降到负的200
-300个单位，然后基本平稳，怎么回事呢？用的是屈臣氏的蒸馏水和乙腈梯度洗脱。之前用的是娃哈哈纯净水，走梯度总是有一个几十甚至是上百的大峰，但基线很平；现在大峰变得很小，只有几个单位，但是基线很不平……（梯度条件：B%:50%——5min—100% —10min—100%）。50%异丙醇冲系统半个小时后254nm漂移略 有改善，但220nm无变化，跪求各位高手指点啊！很急，谢谢！！
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一分耕耘，一分收获。
1楼2011-07-19 13:26:06
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

jinglh8288(金币+1): 谢谢啊…… 2011-07-20 08:32:40
是梯度洗脱峰吧，梯度变化也太快了。
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2楼2011-07-19 15:24:36
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ltxin2009 at 2011-07-19 15:24:36:
是梯度洗脱峰吧，梯度变化也太快了。

30min乙腈从50%变化到100%也是基线很不稳啊……220的波动使检测根本没法进行！
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一分耕耘，一分收获。
3楼2011-07-20 08:33:59
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ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by jinglh8288 at 2011-07-20 08:33:59:
30min乙腈从50%变化到100%也是基线很不稳啊……220的波动使检测根本没法进行！

什么仪器？
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4楼2011-07-20 08:39:46
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ltxin2009 at 2011-07-20 08:39:46:
什么仪器？

刚买两个月的安捷伦1260
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一分耕耘，一分收获。
5楼2011-07-21 07:51:55
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hjx990

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

jinglh8288(金币+3): 谢谢！ 2011-07-21 12:58:33
我是用岛津的液谱。一次听负责维修的工程师说起过，液谱走基线很不稳定，有可能是柱子有问题。建议你清洗预处理柱子，检查柱子情况。
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6楼2011-07-21 08:55:08
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swt1898

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

jinglh8288(金币+4): 谢谢!等度没问题！ 2011-07-21 12:56:39
多方面原因啊，新仪器应该不是氘灯的问题，柱子应该也是新的，走一下等度看看是否也是，很可能是试剂的问题
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7楼2011-07-21 11:30:50
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by swt1898 at 2011-07-21 11:30:50:
多方面原因啊，新仪器应该不是氘灯的问题，柱子应该也是新的，走一下等度看看是否也是，很可能是试剂的问题

等度没问题就证明是试剂的问题么？100%乙腈，80%乙腈 ，10%乙腈都没有问题……
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一分耕耘，一分收获。
8楼2011-07-21 12:57:40
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hjx990 at 2011-07-21 08:55:08:
我是用岛津的液谱。一次听负责维修的工程师说起过，液谱走基线很不稳定，有可能是柱子有问题。建议你清洗预处理柱子，检查柱子情况。

有一根新柱子都没有用过，刚用时总是有很多杂峰，后来就开始出现基线漂移严重的现象，再换另外一根柱子B也出现了基线漂移严重的现象，之前那根柱子B是走梯度总有一个大峰出来……
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一分耕耘，一分收获。
9楼2011-07-21 13:00:37
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绿茶清香

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

jinglh8288(金币+2): 恩，确实是啊…… 2011-07-21 15:20:15
柱子一定 要洗干净，流动相配制的时候一定注意，不要有杂质了~~外面卖的水也不好说。。
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10楼2011-07-21 14:45:08
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