24小时热门版块排行榜    

查看: 3020  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

海浪016

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于高效液相色谱HPLC 梯度洗脱的问题 已有4人参与

我有个样品是用HPLC梯度洗脱 来进行液相分析,但是配出来的流动相在洗脱过程中的主峰出峰时间总是变化,比如说配了一瓶流动相 出峰时间为35min,再配一瓶流动相打样的时候主峰出峰时间可能就变成了25min或45min。请教一下各位虫友,这可能是什么原因?
说明一下:1、我配制的流动相A为磷酸二氢铵缓冲液,PH用磷酸调节为3.1,该缓冲液过滤后经过超声后使用。梯度洗脱的流动相B为色谱乙腈。
                  2、在整个过程中其他条件都相同,比如所用仪器相同、柱温相同、色谱柱相同,进样量、标准品相同、检测波长相同。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海浪016

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by torekill at 2014-11-26 08:51:34
如果仪器没有问题的话,怀疑是流动相的问题

那流动相有问题的话,是缓冲盐的影响还是PH的影响?哪个影响大?怎么影响?
7楼2014-11-26 08:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

yuecen

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
海浪016: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-26 08:59:43
您的流动相是偏酸性的,样品出峰在25-45min之间,说明样品在这个PH条件下比较敏感,或者说是正好在它的敏感点上,建议查查样品的PKA或PKB的值,使流动相的PH值跳出样品的敏感范围就好了。我猜您的样品是有些偏酸性的,所以估计PH增加2-3个就好了,但那样可能会造成样品出峰靠前,如果您是做有关物质不能满足要求的话,就只好考虑换个流动相啦
2楼2014-11-25 23:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
海浪016: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-26 08:59:59
出现这么大的偏差,直觉不是方法的事儿,对比一下色谱柱是否出现问题,还有仪器状态是否良好,多半是仪器系统出了问题,观察一下系统压力有没有波动很大.
gwmgyp
3楼2014-11-26 08:14:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海浪016

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gwmgyp at 2014-11-26 08:14:32
出现这么大的偏差,直觉不是方法的事儿,对比一下色谱柱是否出现问题,还有仪器状态是否良好,多半是仪器系统出了问题,观察一下系统压力有没有波动很大.

压力、仪器都是正常的。就是换一瓶流动相后出峰时间就有可能变化了。一开始我认为是流动相的PH有问题,但测定后PH基本相同,再说对于一种成品的标准检验方法来说,流动相PH的略微变化应该对主峰的出峰时间影响很小。
后来发现分析中心一分析员配出来的流动相总是在40-45分钟左右,而我重新按方法配出来的一般在30分钟左右,所以我想是不是在溶解缓冲盐的过程中是不是没有溶解完全。请问一下,在流动相配置的过程中缓冲盐的浓度对出峰时间的影响?
4楼2014-11-26 08:51:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 324求调剂 +5 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 5/250 2026-03-20 22:30 by 促天成
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +8 niko- 2026-03-19 9/450 2026-03-20 21:57 by luoyongfeng
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +19 不知道叫什么! 2026-03-15 21/1050 2026-03-20 20:48 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +5 Mqqqqqq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:46 by zhukairuo
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
信息提示
请填处理意见