应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 其它 » 关于高效液相色谱HPLC 梯度洗脱的问题
51/1返回列表
查看: 3019  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

海浪016

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于高效液相色谱HPLC 梯度洗脱的问题 已有4人参与

我有个样品是用HPLC梯度洗脱 来进行液相分析，但是配出来的流动相在洗脱过程中的主峰出峰时间总是变化，比如说配了一瓶流动相 出峰时间为35min，再配一瓶流动相打样的时候主峰出峰时间可能就变成了25min或45min。请教一下各位虫友，这可能是什么原因？
说明一下：1、我配制的流动相A为磷酸二氢铵缓冲液，PH用磷酸调节为3.1，该缓冲液过滤后经过超声后使用。梯度洗脱的流动相B为色谱乙腈。
                  2、在整个过程中其他条件都相同，比如所用仪器相同、柱温相同、色谱柱相同，进样量、标准品相同、检测波长相同。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-25 21:18:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
海浪016: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-26 09:01:04
如果仪器没有问题的话，怀疑是流动相的问题
赞一下 回复此楼
5楼2014-11-26 08:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

yuecen

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
海浪016: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-26 08:59:43
您的流动相是偏酸性的，样品出峰在25-45min之间，说明样品在这个PH条件下比较敏感，或者说是正好在它的敏感点上，建议查查样品的PKA或PKB的值，使流动相的PH值跳出样品的敏感范围就好了。我猜您的样品是有些偏酸性的，所以估计PH增加2-3个就好了，但那样可能会造成样品出峰靠前，如果您是做有关物质不能满足要求的话，就只好考虑换个流动相啦
赞一下 回复此楼
2楼2014-11-25 23:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
海浪016: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-26 08:59:59
出现这么大的偏差,直觉不是方法的事儿,对比一下色谱柱是否出现问题,还有仪器状态是否良好,多半是仪器系统出了问题,观察一下系统压力有没有波动很大.
赞一下(1人) 回复此楼
gwmgyp
3楼2014-11-26 08:14:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海浪016

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gwmgyp at 2014-11-26 08:14:32
出现这么大的偏差,直觉不是方法的事儿,对比一下色谱柱是否出现问题,还有仪器状态是否良好,多半是仪器系统出了问题,观察一下系统压力有没有波动很大.

压力、仪器都是正常的。就是换一瓶流动相后出峰时间就有可能变化了。一开始我认为是流动相的PH有问题，但测定后PH基本相同，再说对于一种成品的标准检验方法来说，流动相PH的略微变化应该对主峰的出峰时间影响很小。
后来发现分析中心一分析员配出来的流动相总是在40-45分钟左右，而我重新按方法配出来的一般在30分钟左右，所以我想是不是在溶解缓冲盐的过程中是不是没有溶解完全。请问一下，在流动相配置的过程中缓冲盐的浓度对出峰时间的影响？
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-26 08:51:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分，一志愿四川大学，诚心求调剂 +8 吃吃吃才有意义 2026-03-19 8/400 2026-03-21 00:49 by 刘国森
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +3 ￣^￣゜汗 2026-03-19 4/200 2026-03-20 21:01 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +5 Mqqqqqq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:46 by zhukairuo
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +13 曦熙兮 2026-03-15 13/650 2026-03-20 19:35 by Dream007008
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭