24小时热门版块排行榜    

查看: 3022  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

海浪016

铜虫 (小有名气)

[求助] 关于高效液相色谱HPLC 梯度洗脱的问题 已有4人参与

我有个样品是用HPLC梯度洗脱 来进行液相分析,但是配出来的流动相在洗脱过程中的主峰出峰时间总是变化,比如说配了一瓶流动相 出峰时间为35min,再配一瓶流动相打样的时候主峰出峰时间可能就变成了25min或45min。请教一下各位虫友,这可能是什么原因?
说明一下:1、我配制的流动相A为磷酸二氢铵缓冲液,PH用磷酸调节为3.1,该缓冲液过滤后经过超声后使用。梯度洗脱的流动相B为色谱乙腈。
                  2、在整个过程中其他条件都相同,比如所用仪器相同、柱温相同、色谱柱相同,进样量、标准品相同、检测波长相同。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海浪016

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gwmgyp at 2014-11-26 08:14:32
出现这么大的偏差,直觉不是方法的事儿,对比一下色谱柱是否出现问题,还有仪器状态是否良好,多半是仪器系统出了问题,观察一下系统压力有没有波动很大.

压力、仪器都是正常的。就是换一瓶流动相后出峰时间就有可能变化了。一开始我认为是流动相的PH有问题,但测定后PH基本相同,再说对于一种成品的标准检验方法来说,流动相PH的略微变化应该对主峰的出峰时间影响很小。
后来发现分析中心一分析员配出来的流动相总是在40-45分钟左右,而我重新按方法配出来的一般在30分钟左右,所以我想是不是在溶解缓冲盐的过程中是不是没有溶解完全。请问一下,在流动相配置的过程中缓冲盐的浓度对出峰时间的影响?
4楼2014-11-26 08:51:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

yuecen

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
海浪016: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-26 08:59:43
您的流动相是偏酸性的,样品出峰在25-45min之间,说明样品在这个PH条件下比较敏感,或者说是正好在它的敏感点上,建议查查样品的PKA或PKB的值,使流动相的PH值跳出样品的敏感范围就好了。我猜您的样品是有些偏酸性的,所以估计PH增加2-3个就好了,但那样可能会造成样品出峰靠前,如果您是做有关物质不能满足要求的话,就只好考虑换个流动相啦
2楼2014-11-25 23:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
海浪016: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-26 08:59:59
出现这么大的偏差,直觉不是方法的事儿,对比一下色谱柱是否出现问题,还有仪器状态是否良好,多半是仪器系统出了问题,观察一下系统压力有没有波动很大.
gwmgyp
3楼2014-11-26 08:14:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
海浪016: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-11-26 09:01:04
如果仪器没有问题的话,怀疑是流动相的问题
5楼2014-11-26 08:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +10 冷笙123 2026-03-17 10/500 2026-03-21 01:54 by JourneyLucky
[考研] 297求调剂 +9 戏精丹丹丹 2026-03-17 9/450 2026-03-21 01:49 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +3  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 4/200 2026-03-20 21:01 by zhukairuo
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +19 不知道叫什么! 2026-03-15 21/1050 2026-03-20 20:48 by zhukairuo
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生(接收计算机专业调剂) +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 303求调剂 +4 睿08 2026-03-17 6/300 2026-03-18 11:01 by Iveryant
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
信息提示
请填处理意见