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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 半定量ＲT-PCR与普通PCR是一样的吗
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带锁的季节

银虫 (小有名气)

[求助] 半定量ＲT-PCR与普通PCR是一样的吗 已有1人参与

今天在文献中看到半定量ＲT-PCR，百度上说半定量是通过核酸电泳亮度查看的，这里的ＲＴ是反转录，那么我可以说这与普通ＰＣＲ是一样的吗？？？
实时荧光定量ＰＣＲ通过ＣＴ值来计算某基因的表达量，那么这个实验反应之后的样品做核酸电泳是不就相当于普通ＰＣＲ做的核酸电泳，可以这样理解吗？
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1楼 2014-11-25 18:04:00
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带锁的季节

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cckk_2000 at 2014-11-25 19:03:32
首先普通PCR是以基因组DNA为模板，扩增想要的目的片段。
RT-PCR是提取细胞或组织中的mRNA，反转录cDNA，然后设计引物进行PCR，然后可以通过亮度反映在干预前后该基因的表达量变化，但是由于它通过灰度值比较，因此 ...

哦哦  似乎明白了些
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3楼2014-11-26 09:14:14
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cckk_2000

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
带锁的季节: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-26 09:12:43
首先普通PCR是以基因组DNA为模板，扩增想要的目的片段。
RT-PCR是提取细胞或组织中的mRNA，反转录cDNA，然后设计引物进行PCR，然后可以通过亮度反映在干预前后该基因的表达量变化，但是由于它通过灰度值比较，因此只能说半定量分析。
QPCR是同样以cDNA为模板进行扩增，但是它通过设计荧光淬灭引物或者引入荧光染料，实时监控荧光值得变化，通过达到阈值的循环次数（Ct）来反映样本中某个基因的表达情况，可以说比RT更准确，直接，但是它只是显示两者是否有差异。qPCR结果一般也不跑电泳的。
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科研炮灰
2楼2014-11-25 19:03:32
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