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半定量RT-PCR与普通PCR是一样的吗 已有1人参与
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今天在文献中看到半定量RT-PCR,百度上说半定量是通过核酸电泳亮度查看的,这里的RT是反转录,那么我可以说这与普通PCR是一样的吗??? 实时荧光定量PCR通过CT值来计算某基因的表达量,那么这个实验反应之后的样品做核酸电泳是不就相当于普通PCR做的核酸电泳,可以这样理解吗? |
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【答案】应助回帖
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带锁的季节: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-26 09:12:43
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首先普通PCR是以基因组DNA为模板,扩增想要的目的片段。 RT-PCR是提取细胞或组织中的mRNA,反转录cDNA,然后设计引物进行PCR,然后可以通过亮度反映在干预前后该基因的表达量变化,但是由于它通过灰度值比较,因此只能说半定量分析。 QPCR是同样以cDNA为模板进行扩增,但是它通过设计荧光淬灭引物或者引入荧光染料,实时监控荧光值得变化,通过达到阈值的循环次数(Ct)来反映样本中某个基因的表达情况,可以说比RT更准确,直接,但是它只是显示两者是否有差异。qPCR结果一般也不跑电泳的。 |

2楼2014-11-25 19:03:32
3楼2014-11-26 09:14:14












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