| 查看: 5892 | 回复: 14 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
OD值偏高的问题 已有1人参与
|
||
| 我是通过抗原免疫后测定血清中抗体效价问题，包被抗原5ug/ml,每孔100ul；封闭；血清采用倍比稀释，1:10,1:20……1:6400，每孔100ul；二抗结合，1:5000稀释；底物结合。最后结果对照组和实验组OD值偏高，高的达到了2.3左右，对照组OD值相对低一点，但是实验组与之相比未达到显著，求高人指点下问题出在哪了？bb不多，先谢过了！ |
回复此楼» 猜你喜欢
职称评审没过，求安慰
已经有41人回复
-
回收溶剂求助
已经有7人回复
-
硝基苯如何除去
已经有3人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
-
垃圾破二本职称评审标准
已经有17人回复
-
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿
已经有22人回复
-
EST投稿状态问题
已经有7人回复
-
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦
已经有4人回复
-
求助文献
已经有3人回复
-
三无产品还有机会吗
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 夹心ELISA，阴性值、空白值过高。
已经有8人回复
- 大肠杆菌培养过程中OD600相关问题？
已经有6人回复
- 封闭液 和 显色
已经有8人回复
- 琼脂糖电泳和OD230 OD 260 OD 280
已经有11人回复
- 做吸附材料时，出现了很多问题，希望高手提供宝贵意见
已经有18人回复
- 关于ELISA复孔的设置
已经有6人回复
- 间接竞争ELISA中OD值测定结果有问题
已经有6人回复
- 高密度发酵技术
已经有27人回复
- 96孔板为什么总是左边板子比右边的OD值高？？？？
已经有5人回复
- ELISA 显色液空白OD偏高，P/N偏小，是否可以每孔OD减去显色液对照的值?
已经有5人回复
- ELISA同一样品，稀释倍数越高，得到结果越大？为嘛？
已经有16人回复
- 考马斯亮蓝测蛋白含量，蒸馏水吸光值比样品高
已经有17人回复
- 微量紫外测DNA OD260\OD280的比值
已经有8人回复
- 怎么提高诱导表达的目的蛋白含量
已经有14人回复
- ELISA TMB显色液怎么配制？我配的怎么一混合就浑浊了？
已经有13人回复
- 【求助】请教一下高手，OD什么意思啊？呵呵~
已经有9人回复
- 【求助/交流】间接Elisa中，抗原浓度越高，阳性值反而越低？
已经有10人回复
- 【求助】关于Mark-Houwink方程中的K、a值
已经有3人回复
- 【求助/交流】竞争性ELISA 竞争孔比稀释孔OD值高
已经有13人回复
- 电转化注意事项
已经有14人回复
送红花一朵 
8楼2014-11-24 09:49:04
2楼2014-11-23 22:21:38
3楼2014-11-23 22:37:41
|
我是通过抑制素抗原免疫獭兔后测定抑制素（inhibin）抗体效价，下面是我的实验方案 1 用包被缓冲液将inhibin（当初注射用的抗原，inhibin完全重组蛋白）稀释至5ug/ml，每孔100ul，4℃过夜。次日洗涤三次，每次两分钟。 2 动物血清梯度稀释（1:10 1:100……1:1000000）后来改为（1:10,1:20……），每孔100ul，室温孵育1h，洗涤三次，同时做空白对照，阴性对照（就是我在实验中设的对照，未注射抗原） 3 加入新鲜稀释的酶标二抗（羊抗兔），1:5000稀释，100ul，室温孵育45min，洗涤 4 加入底物显色液TMB，新鲜配制，100ul每孔，室温15min 5 加2M 硫酸 200ul每孔，终止 6 elisa检测仪检测450nm处OD值 我原本是打算：比较实验组和阴性对照组的OD值确定阳性阴性的，但是测定的OD值（1）OD值普遍较高；（2）虽然同一稀释度下，实验组OD值高于对照组，但没有达到判定阳性的水平。可以确定的是：实验组中肯定有抑制素抗体，因为通过其他途径的激素变化已经确定了。是不是试验步骤 加量方面存在问题呀？？求指导 |
4楼2014-11-23 22:39:42