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天湖酒

新虫 (初入文坛)

[交流] 大肠杆菌培养过程中OD600相关问题?

基于大肠杆菌的重组蛋白诱导表达,我是过夜培养种子液,再接新培养基长到OD600=0.6~0.8再诱导,想问可否直接将种子液稀释到这个OD600=0.6~0.8的范围,就直接诱导?菌体密度是不是就是生长状态了,这样接到新培养基的状态就是对数生长期了吗?
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)


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前者的菌体活力旺盛,诱导效果甚佳。
2楼2014-05-23 18:58:36
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biostar2008

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2014-05-24 09:14:52
稀释后尽管OD符合条件,但菌体生理状态不一样。接到新培养基中还是从延滞期开始,只不过由于种子的状态好,延滞期缩短,但仍不是对数期。
3楼2014-05-23 19:44:00
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不是,菌种接入新的培养基都会有延迟期,并不是浓度高了就直接是对数期,只是接种量大的时候延迟期会变短。
菌体密度与生长状态无关,与生长速率有关。
4楼2014-05-24 09:18:21
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yunyi712100

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的目的是要在指数期,不是OD,OD是光密度的缩写,只表示菌量。
5楼2014-05-24 18:43:13
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
生长曲线类似于一个S型的曲线,诱导要求处于指数生长期,主要的是细菌的活性,而经过各种保存和稀释后,细菌的活性会有所改变,所以尽量不要稀释。

你在培养的过程中,过一个小时就测一下光密度,达到了就拿出来用
环境卫生、微生物学、卫生应急
6楼2014-05-26 07:19:12
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wangju87c

银虫 (正式写手)


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你没有深入理解什么是微生物的培养。过夜培养16小时,菌体早就进入平稳期了,有很多基因工程菌是在生长旺盛,菌体活力强盛的对数生长期时,加入诱导剂,再分泌目标蛋白的。菌体活力衰弱,表达出来的蛋白量很少的,跑个电泳,条带区别很明显的
哥已婚
7楼2014-05-27 14:07:31
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