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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » elisa实验分析
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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)

[求助] elisa实验分析 已有1人参与

在测定抗体效价的时候，一般样本值大于阴性值2.1倍可视为阳性，我进行了倍比稀释，但是结果好奇怪，为什么1：100 1：1000稀释的时候，OD的差异都小于2.1 （阴性）反而是1：1000，或者1：10000的时候，显示出阳性了？请问这是为什么。
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1楼 2014-11-16 22:22:49
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陶然悦

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
疯狂的bamboo: 金币+2, ★有帮助 2014-11-17 08:25:13
抗原抗体反应需要合适的比例。
可能你的阴性血清中有能和抗原反应的抗体。要不换个阴性血清试试。

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2楼2014-11-16 22:34:42
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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 陶然悦 at 2014-11-16 22:34:42
抗原抗体反应需要合适的比例。
可能你的阴性血清中有能和抗原反应的抗体。要不换个阴性血清试试。

我想先问一个问题啊 我当初刚开始学做elisa测抗原的时候是说：一般在测抗原或者抗体阴性血清是不含抗原抗体的，而阳性血清是有的，阴性和阳性血清都是自己弄得。按那个意思我肯定没有阳性血清，因为没那个抗体。但是我在测定抗体效价的时候查到的内容是不一样的：网上说：一共做三个对照：空白，PBST；阴性血清，做实验的对照组；阳性血清，我的实验组，然后去比较OD值，请问这样理解有问题吗？？
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3楼2014-11-17 08:24:53
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陶然悦

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 疯狂的bamboo at 2014-11-17 08:24:53
我想先问一个问题啊 我当初刚开始学做elisa测抗原的时候是说：一般在测抗原或者抗体阴性血清是不含抗原抗体的，而阳性血清是有的，阴性和阳性血清都是自己弄得。按那个意思我肯定没有阳性血清，因为没那个抗体。但 ...

按那个意思，你也有阳性血清，自己制得也是阳性啊！
另外我想了想，是不是你抗原的特异性不高？

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4楼2014-11-17 09:06:26
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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 陶然悦 at 2014-11-17 09:06:26
按那个意思，你也有阳性血清，自己制得也是阳性啊！
另外我想了想，是不是你抗原的特异性不高？
...

我是做免疫试验的 得自己制备抗体 所以阳性血清肯定没有的，我是要测自己制备的抗体效价 要说特异性问题 我包被的抗原就是当初我注射的抗原 所以特异性应该还行的吧
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5楼2014-11-17 09:46:42
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pengyong554

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 陶然悦 at 2014-11-17 09:06:26
按那个意思，你也有阳性血清，自己制得也是阳性啊！
另外我想了想，是不是你抗原的特异性不高？
...

“一般在测抗原或者抗体阴性血清是不含抗原抗体的”这句话我听不懂 我们实验室测血清效价，只有用buffer作为空白对照 不知道阴性对照是什么鬼
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长征永远在路上!
6楼2018-06-22 08:55:18
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pengyong554

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 疯狂的bamboo at 2014-11-17 08:24:53
我想先问一个问题啊 我当初刚开始学做elisa测抗原的时候是说：一般在测抗原或者抗体阴性血清是不含抗原抗体的，而阳性血清是有的，阴性和阳性血清都是自己弄得。按那个意思我肯定没有阳性血清，因为没那个抗体。但 ...

你们的阴性血清是采的空白血清吗？我们测效价就是1:1000稀释，测得挺好的
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长征永远在路上!
7楼2018-06-22 08:59:33
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