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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请问elisa实验组和对照组都显色怎么解决？
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tjutacit

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问elisa实验组和对照组都显色怎么解决？ 已有6人参与

实验目的是为了检验偶联抗原是否成功（地高辛+BSA），用偶联产物和OVA、BSA分别包被，用OVA封闭一抗为鼠抗地高辛单抗（santa cruz)，二抗为HRP标记的羊抗鼠。操作中每回都洗五次，三次PBST两次PBS。最后用TMB使用液显色，所有空都显深蓝色。
做了三次了，都是这样。担心封闭不足，我用封闭液加满空，并延长了封闭时间。并且洗得也很认真，不知道怎么还是这样，请大家帮帮我
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1楼 2010-07-03 22:34:38
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tjutacit

铜虫 (小有名气)
请大家帮帮忙，谢谢！
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2楼2010-07-04 08:32:06
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看天

木虫 (知名作家)
tjutacit(金币+10): 2010-07-05 15:52:40
引用回帖:
Originally posted by tjutacit at 2010-07-04 08:32:06:
请大家帮帮忙，谢谢！

专业不相关 帮顶
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
3楼2010-07-04 10:48:31
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wyrsunnyy

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-09-06 12:17:15
首先，所有孔都显色不一定是封闭的问题，有可能洗液（pbst）时间久了，或者显色液染菌了等，每一种试剂都有能影响显色，你仔细检查一下；
我们检测抗原是否联上一般不用ELISA阿，用核磁扫描或者做个质谱。
不知道能否帮到你！
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4楼2010-07-29 16:18:03
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xiao_jiajia

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们检测偶联与否是用紫外和凝胶电泳做的
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5楼2010-09-06 12:03:25
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bunny0512

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
只做对照组,看是不是对照物有污染.另外做个空白组.
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在哪里~在哪里见过你~
6楼2010-09-06 12:51:42
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zhangcan159

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你做个棋牌稀释法，有时候是你加的一抗或二抗或底物浓度过高，我以前做竞争性的那个就是抗体加多了，所以吸附量都饱和了，没有不饱和的，所以没有区别了
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走自己的路，让别人说去吧！
7楼2014-12-10 17:29:04
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