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双抗夹心ELISA方法的建立 已有6人参与
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我做双抗夹心ELISA时遇到下面的情况，求高手指教“一抗+5%的脱脂奶粉封闭+阴阳血清及空白对照+自己标记的HRP二抗+显色+终止“，结果阴性和空白都呈阳性，能不能帮忙分析分析是什么原因造成的？？？？？？？？？？ 一抗和二抗都是由本实验室自己制备的！ |
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4楼2014-11-18 11:14:21
biotech_zhou
木虫 (著名写手)
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2楼2014-11-14 21:01:54
【答案】应助回帖
★ ★ ★
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电风扇魏哥: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-05-04 14:53:43
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电风扇魏哥: 金币+1, ★★★很有帮助 2015-05-04 14:53:43
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第一，你的阴性血清是从哪里来的？这些东西不能自己随随便便制备，需要从正规科研所购买 第二，你的二抗是是否确实标记上了，是否验证能否显色，可能是你中间的步骤不合理，我们没有看到这个关键的标记步骤不能随便下结论 第三，你的显色液是否用二抗证明有显色，如果没有，可取少量显色液加入少量二抗证明之 第四，你的包被蛋白用的包被液是什么成分，一般情况下是碳酸盐 ，另外是否证明已经包被上了？ [ 发自小木虫客户端 ] |
3楼2014-11-15 07:25:59
sfeqhl
铁虫 (正式写手)
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- 专业: 免疫生物学
5楼2014-11-19 18:10:09
40