应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 双抗体夹心ELISA，阴性值很高，怎么回事呢
421/1返回列表
查看: 2576  |  回复: 41
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看

阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

[交流] 双抗体夹心ELISA，阴性值很高，怎么回事呢

一直的实验条件都没有变，以前做的空白血浆OD最高也就0.2多，好的话小于0.1
可是这两次的空白血浆OD就是0.6-0.7，这也太离谱了吧

我是用5%BSA进行封闭的，这两次买的BSA和以前的不是一个公司，美国罗氏的，应该也不会有问题啊，手动洗板4次，每次5分钟

求救，导致阴性值升高的原因都有哪些啊？？

[ Last edited by silicare on 2014-4-3 at 10:45 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-09-26 10:00:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

yaojc

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
阿娇阿娇: 金币+5 2012-10-05 18:28:33
silicare: BioEPI+1 2014-04-04 09:58:14
1、孵育时最好使用封口膜，防止液体挥发。
2、手工洗板需防止孔间交叉污染。
3、观察样本是否长菌，变浑浊。
4、显色剂是否过期，TMB是否有肉眼可见的浅蓝色。
5、微孔板底部是否洁净。
暂时就想到这些，希望有帮助。
赞一下(1人) 回复此楼
39楼2012-10-05 15:13:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

blackdogzmz

木虫 (职业作家)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
不懂,但帮顶一下,让别人来答.....
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-26 10:32:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燃烧de笑

木虫 (知名作家)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
不懂,但帮顶一下
回复此楼
3楼2012-09-26 10:48:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoqi5992

银虫 (正式写手)
★ ★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-10-02 06:54:35
1.季节的变化会不会导致显色的差异啊，加样操作，洗板应该都是在室温下进行的吧。
2.显色底物放的是不是时间长了啊。
我能想到的就这两点了，不知道对不对。
赞一下 回复此楼
8楼2012-09-26 17:09:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaoqi5992 at 2012-09-26 17:09:36
1.季节的变化会不会导致显色的差异啊，加样操作，洗板应该都是在室温下进行的吧。
2.显色底物放的是不是时间长了啊。
我能想到的就这两点了，不知道对不对。

谢谢
回复此楼
9楼2012-09-26 17:14:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liufuliang

新虫 (知名作家)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
污染？
回复此楼
10楼2012-09-26 17:23:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lyd850119

金虫 (正式写手)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
光栅会不会有问题。。
赞一下 回复此楼
12楼2012-09-26 17:24:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

conanzzz

木虫 (正式写手)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
我也是...
回复此楼
16楼2012-09-26 17:39:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
温度影响的吧~~~~~~~~~~~~~~~`
赞一下 回复此楼
19楼2012-09-26 17:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liufudong

禁虫 (职业作家)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽
21楼2012-09-26 18:06:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by liufuliang at 2012-09-26 17:23:52
污染？

What?
回复此楼
26楼2012-09-27 09:39:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weigb503

铁杆木虫 (小有名气)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
把具体的实验步骤稍微写一下，不然不好分析了，中间很多因素导致阴性和空白OD值比较高。
赞一下 回复此楼
27楼2012-09-29 08:28:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gcworm

木虫 (职业作家)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
路过，帮你顶一下
回复此楼
31楼2012-09-29 09:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
如果这样的话，你的结果和你之前用另外一个公司的结果没有可比性了就。
即使通一个公司的产品不同批次也会有所差异结果，但是像你说的这么大差异没见过，只有这样，你以后所有试验，需要跟你现在结果进行比较的，全部用同样公司同样批次的，最后把你的BASELINE调高一点就行啦哈，这样结果才具有可能性。
我是ELISA和QPCR，ELISA值部分在0.1-0.3之间，而QPCR结果的LOG COPY NUMBER/ug值太高，全部都在3-8之间，因此我就设定其BASELINE为3，这样，所有数值就是LOG COPY NUMBER/ng, 都在0-5之间了。
赞一下 回复此楼
32楼2012-09-29 09:27:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gcworm

木虫 (职业作家)
路过，帮你顶一下
回复此楼
33楼2012-09-29 17:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
引用回帖:
39楼: Originally posted by yaojc at 2012-10-05 15:13:55
1、孵育时最好使用封口膜，防止液体挥发。
2、手工洗板需防止孔间交叉污染。
3、观察样本是否长菌，变浑浊。
4、显色剂是否过期，TMB是否有肉眼可见的浅蓝色。
5、微孔板底部是否洁净。
暂时就想到这些，希望有 ...

谢谢，我最近做的好几次，阴性孔阳性孔全部不显色，那个郁闷啊，东西都是新换的，只有显色液（自己配置的）在4度放了3个多月，难道失效了吗？
赞一下 回复此楼
40楼2012-10-30 16:57:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxm0322

银虫 (初入文坛)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
我也遇到这个问题了，感觉是洗的不彻底的问题
赞一下 回复此楼
42楼2014-04-03 10:03:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
gkf1234楼
2012-09-26 11:07   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
chenghu5楼
2012-09-26 11:08   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
sszzpp6楼
2012-09-26 11:26   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
xxbis097楼
2012-09-26 11:28   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
shannon201011楼
2012-09-26 17:24   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
flyxu13楼
2012-09-26 17:26   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
clarktao14楼
2012-09-26 17:29   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
残暴的肉球15楼
2012-09-26 17:32   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
10临药田中华17楼
2012-09-26 17:41   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
失落的豇豆18楼
2012-09-26 17:49   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
qwer.20楼
2012-09-26 18:03   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
chenruia22楼
2012-09-26 18:13   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
chenzhana23楼
2012-09-26 18:31   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
hbmy24楼
2012-09-26 18:42   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
liang888725楼
2012-09-26 18:51   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
gladjingjing28楼
2012-09-29 08:58   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
orchem29楼
2012-09-29 09:09   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
江南的竹30楼
2012-09-29 09:16   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
紫蝶f134楼
2012-09-29 17:50   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
mercivous35楼
2012-09-29 18:07   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
chenruia36楼
2012-09-29 18:25   回复  
梦婷婷玉丽37楼
2012-09-29 18:27   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
wasxnbe38楼
2012-09-29 18:28   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
zzz11941楼
2012-11-10 14:03   回复  
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 阿娇阿娇 的主题更新
421/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:47 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:46 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 5/250 2026-02-08 08:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:27 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:26 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:12 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:07 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 08:06 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:32 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人） +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭