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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 双抗体夹心ELISA，阴性值很高，怎么回事呢
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

[交流] 双抗体夹心ELISA，阴性值很高，怎么回事呢

一直的实验条件都没有变，以前做的空白血浆OD最高也就0.2多，好的话小于0.1
可是这两次的空白血浆OD就是0.6-0.7，这也太离谱了吧

我是用5%BSA进行封闭的，这两次买的BSA和以前的不是一个公司，美国罗氏的，应该也不会有问题啊，手动洗板4次，每次5分钟

求救，导致阴性值升高的原因都有哪些啊？？

[ Last edited by silicare on 2014-4-3 at 10:45 ]
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1楼 2012-09-26 10:00:29
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yaojc

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
阿娇阿娇: 金币+5 2012-10-05 18:28:33
silicare: BioEPI+1 2014-04-04 09:58:14
1、孵育时最好使用封口膜，防止液体挥发。
2、手工洗板需防止孔间交叉污染。
3、观察样本是否长菌，变浑浊。
4、显色剂是否过期，TMB是否有肉眼可见的浅蓝色。
5、微孔板底部是否洁净。
暂时就想到这些，希望有帮助。
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39楼2012-10-05 15:13:55
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blackdogzmz

木虫 (职业作家)
★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
不懂,但帮顶一下,让别人来答.....
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2楼2012-09-26 10:32:08
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xiaoqi5992

银虫 (正式写手)
★ ★
阿娇阿娇(金币+1): 谢谢参与
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-10-02 06:54:35
1.季节的变化会不会导致显色的差异啊，加样操作，洗板应该都是在室温下进行的吧。
2.显色底物放的是不是时间长了啊。
我能想到的就这两点了，不知道对不对。
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8楼2012-09-26 17:09:36
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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaoqi5992 at 2012-09-26 17:09:36
1.季节的变化会不会导致显色的差异啊，加样操作，洗板应该都是在室温下进行的吧。
2.显色底物放的是不是时间长了啊。
我能想到的就这两点了，不知道对不对。

谢谢
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9楼2012-09-26 17:14:50
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