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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

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虫号: 1407794

[交流] 双抗体夹心ELISA，阴性值很高，怎么回事呢

一直的实验条件都没有变，以前做的空白血浆OD最高也就0.2多，好的话小于0.1
可是这两次的空白血浆OD就是0.6-0.7，这也太离谱了吧

我是用5%BSA进行封闭的，这两次买的BSA和以前的不是一个公司，美国罗氏的，应该也不会有问题啊，手动洗板4次，每次5分钟

求救，导致阴性值升高的原因都有哪些啊？？

[ Last edited by silicare on 2014-4-3 at 10:45 ]

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1楼 2012-09-26 10:00:29

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阿娇阿娇

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

39楼: Originally posted by yaojc at 2012-10-05 15:13:55
1、孵育时最好使用封口膜，防止液体挥发。
2、手工洗板需防止孔间交叉污染。
3、观察样本是否长菌，变浑浊。
4、显色剂是否过期，TMB是否有肉眼可见的浅蓝色。
5、微孔板底部是否洁净。
暂时就想到这些，希望有 ...

谢谢，我最近做的好几次，阴性孔阳性孔全部不显色，那个郁闷啊，东西都是新换的，只有显色液（自己配置的）在4度放了3个多月，难道失效了吗？