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wucong5475新虫 (初入文坛)
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怎么使用DNase已有1人参与
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我的目的是除去蛋白质样品中的DNA成分,不知道怎么使用DNase,使用说明上写的是怎样提取RNA时去除DNA的方法,我试了,但我用紫外分光光度法测260nm的吸光值时,发现DNase使用前后没有区别。是紫外分光光度法 有问题还是DNase的使用有问题?请指点。 DNase我是直接加入到蛋白样液中,37度处理30分钟甚至更久,然后加EDTA终止酶反应。 加入10 μl 3 M醋酸钠和250 μl冷乙醇,-80℃放置20 min。 5. 4℃,12,000 rpm离心10 min,弃上清。 6. 加入70%冷乙醇洗净,4℃,12,000 rpm离心5 min,弃上清。 7. 沉淀干燥。 问题:1、是不是紫外分光光度法不能很好的检测结果,DNA是否被消解的问题? 2、DNase的使用方法,是不是要在蛋白质提取过程中加入才有效? |
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