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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】DNase1 如何终止反应？
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niliudeyu

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DNase1 如何终止反应？

DNase1消化样品DNA分别5min  15min  60min后跑电泳，如何终止反应？上网查了一下有方案一：EDTA 2.5mM 65度以上加热10min。方案二：loading buffer。EDTA是否可行？来不及买loading buffer了不懂生物 各位虫友帮帮忙~~~~谢过

[ Last edited by silicare on 2011-3-29 at 14:10 ]
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1楼 2011-03-28 21:20:50
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susizheng

木虫 (著名写手)
niliudeyu(金币+1): 2011-03-29 00:03:32
loading buffer不就是跑电泳时与DNA样品混匀的那个东西吗？只要跑电泳都会用到的东西不会没有吧。
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2楼2011-03-28 22:27:03
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smiled001

禁虫 (小有名气)
★ ★
niliudeyu(金币+1): 2011-03-29 00:03:40
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-03-30 09:44:01
本帖内容被屏蔽
3楼2011-03-28 23:13:43
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
niliudeyu(金币+1): 2011-03-29 00:03:44
看到说明书上有用85度5分钟的！
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4楼2011-03-28 23:26:10
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niliudeyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-03-28 22:27:03:
loading buffer不就是跑电泳时与DNA样品混匀的那个东西吗？只要跑电泳都会用到的东西不会没有吧。

就做这么一次，以前不做 以后估计也不会做。。。
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5楼2011-03-28 23:58:46
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niliudeyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by smiled001 at 2011-03-28 23:13:43:
Takara  10×的loading buffer 含有SDS，可以终止酶促反应
你可以问其他实验室 的同学看有没有

查到这个6×Loading buffer: 　　30mM EDTA 　　36%(v/v) Glycerol （甘油） 　　0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF （二甲苯青FF) 　　0.05%(w/v) Bromophenol BLUE (溴酚蓝)  自己配可以吗？
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6楼2011-03-29 00:00:42
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郝钊

金虫 (小有名气)
★
niliudeyu(金币+2): 2011-03-29 00:42:51
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流，欢迎常来 2011-03-30 09:44:20
大锅，我有个问题，你如果没有loading buffer，上样的时候你怎么办啊？如果你有上述所有药品当然可以自己配，不过太麻烦了。loading buffer这东西，只要做分子的都有一大把一大把的，你找个人要一管呗，或者直接找个试剂公司让他送你一管。
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7楼2011-03-29 00:27:36
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niliudeyu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-03-29 00:27:36:
大锅，我有个问题，你如果没有loading buffer，上样的时候你怎么办啊？如果你有上述所有药品当然可以自己配，不过太麻烦了。loading buffer这东西，只要做分子的都有一大把一大把的，你找个人要一管呗，或者直接找 ...

上样的时候准备用溴酚蓝+蔗糖。。。。。额 那还是去要一管吧 等不起了。。。。
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8楼2011-03-29 00:41:33
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郝钊

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
对啊，又不是很罕见的东西，自己配置太浪费时间了。
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9楼2011-03-29 23:26:19
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65900931

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
高温变性是最简单有效的办法了。
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10楼2011-04-03 10:35:55
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