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niliudeyu

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】DNase1 如何终止反应?

DNase1消化样品DNA分别5min  15min  60min后跑电泳,如何终止反应?上网查了一下有方案一:EDTA 2.5mM 65度以上加热10min。方案二:loading buffer。EDTA是否可行?来不及买loading buffer了不懂生物 各位虫友帮帮忙~~~~谢过

[ Last edited by silicare on 2011-3-29 at 14:10 ]
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niliudeyu(金币+1): 2011-03-29 00:03:32
loading buffer不就是跑电泳时与DNA样品混匀的那个东西吗?只要跑电泳都会用到的东西不会没有吧。
2楼2011-03-28 22:27:03
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smiled001

禁虫 (小有名气)

★ ★
niliudeyu(金币+1): 2011-03-29 00:03:40
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-03-30 09:44:01
本帖内容被屏蔽

3楼2011-03-28 23:13:43
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niliudeyu(金币+1): 2011-03-29 00:03:44
看到说明书上有用85度5分钟的!
4楼2011-03-28 23:26:10
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niliudeyu

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-03-28 22:27:03:
loading buffer不就是跑电泳时与DNA样品混匀的那个东西吗?只要跑电泳都会用到的东西不会没有吧。

就做这么一次,以前不做 以后估计也不会做。。。
5楼2011-03-28 23:58:46
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niliudeyu

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by smiled001 at 2011-03-28 23:13:43:
Takara  10×的loading buffer 含有SDS,可以终止酶促反应
你可以问其他实验室 的同学看有没有

查到这个6×Loading buffer:   30mM EDTA   36%(v/v) Glycerol (甘油)   0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF (二甲苯青FF)   0.05%(w/v) Bromophenol BLUE (溴酚蓝)  自己配可以吗?
6楼2011-03-29 00:00:42
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郝钊

金虫 (小有名气)



niliudeyu(金币+2): 2011-03-29 00:42:51
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流,欢迎常来 2011-03-30 09:44:20
大锅,我有个问题,你如果没有loading buffer,上样的时候你怎么办啊?如果你有上述所有药品当然可以自己配,不过太麻烦了。loading buffer这东西,只要做分子的都有一大把一大把的,你找个人要一管呗,或者直接找个试剂公司让他送你一管。
7楼2011-03-29 00:27:36
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niliudeyu

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-03-29 00:27:36:
大锅,我有个问题,你如果没有loading buffer,上样的时候你怎么办啊?如果你有上述所有药品当然可以自己配,不过太麻烦了。loading buffer这东西,只要做分子的都有一大把一大把的,你找个人要一管呗,或者直接找 ...

上样的时候准备用溴酚蓝+蔗糖。。。。。额 那还是去要一管吧 等不起了。。。。
8楼2011-03-29 00:41:33
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郝钊

金虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
对啊,又不是很罕见的东西,自己配置太浪费时间了。
9楼2011-03-29 23:26:19
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65900931

银虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
高温变性是最简单有效的办法了。
10楼2011-04-03 10:35:55
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