应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » PET28a双酶切，酶切位点之间13bp，可否直接过柱回收
171/2返回列表12下一页
查看: 2477  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] PET28a双酶切，酶切位点之间13bp，可否直接过柱回收 已有5人参与

如题，能不能直接双酶切之后过柱回收，酶切下来的小片段只有13bp
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
踏实
1楼 2014-11-03 12:19:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongdekun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-03 18:02:24
以前也做过类似的事情，酶切充分的话，没问题。
赞一下 回复此楼
2楼2014-11-03 12:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-03 18:02:32
少切点质粒，直接过柱就好

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-03 12:49:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-03 12:49:31
少切点质粒，直接过柱就好

2ug
左右？

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
踏实
4楼2014-11-03 13:32:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-03 18:02:42
酶切是得延长点时间，我现在做的那两个酶切位点之间只有11bp，像以前一样酶切过夜，连接之后发现都没有切开，载体自连了，所以我想延长酶切时间试试，看看效果
赞一下 回复此楼
···
5楼2014-11-03 14:22:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小冀- at 2014-11-03 14:22:38
酶切是得延长点时间，我现在做的那两个酶切位点之间只有11bp，像以前一样酶切过夜，连接之后发现都没有切开，载体自连了，所以我想延长酶切时间试试，看看效果

说明书上一个小时就ok了，我用三个小时，Takara的酶应该没问题
赞一下 回复此楼
踏实
6楼2014-11-03 15:06:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

埋下一座城

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-03 18:02:49
不久前刚切过，用的Takara快酶做的，双酶切片段大小21bp，酶切40min，直接过柱回收，木有问题。
赞一下 回复此楼
7楼2014-11-03 15:18:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
6楼: Originally posted by hajierlove at 2014-11-03 15:06:45
说明书上一个小时就ok了，我用三个小时，Takara的酶应该没问题...

我们这里一般鉴定酶切3小时，连接时酶切过夜，保险一点···
赞一下 回复此楼
···
8楼2014-11-03 15:23:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 埋下一座城 at 2014-11-03 15:18:12
不久前刚切过，用的Takara快酶做的，双酶切片段大小21bp，酶切40min，直接过柱回收，木有问题。

谢谢亲，我胶回收做了一周，十几次，浓度都很低，连上的T7菌液pcr，有目的条带，但是测序不正确，焦虑。今天试了试，晚上连一下
赞一下 回复此楼
踏实
9楼2014-11-03 15:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小冀- at 2014-11-03 15:23:04
我们这里一般鉴定酶切3小时，连接时酶切过夜，保险一点···...

恩恩，也有的说酶切时间久了不好
赞一下 回复此楼
踏实
10楼2014-11-03 15:29:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hajierlove 的主题更新
171/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 7/350 2026-10-31 23:18 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-10-31 23:17 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 5/250 2026-10-31 23:10 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-10-31 23:10 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 12/600 2026-10-31 22:52 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 14/700 2026-10-31 22:46 by YXM1FDCSE8Bn
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 24/1200 2026-10-31 22:39 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-10-31 21:54 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-10-31 21:51 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-10-31 21:51 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 10/500 2026-10-31 21:41 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 9/450 2026-10-31 21:34 by YXM1FDCSE8Bn
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 13/650 2026-10-31 17:12 by hKe7U1kad5Sg
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 18/900 2026-10-31 17:05 by hKe7U1kad5Sg
[考博] 2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向 50+3 yyh@ 2026-10-28 4/200 2026-10-31 12:47 by 可淡不可忘
[硕博家园] 越来越担心硕士毕业后没有竞争力了 +8 zuesli 2026-10-27 14/700 2026-10-30 22:44 by 好运连连公主
[基金申请] 论文的挂名怎么评判贡献？基金申请中，排名第一的挂名文章 +3 biily 2026-10-25 3/150 2026-10-30 18:33 by 旁观2020
[硕博家园] 申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请 +3 小小阿光 2026-10-27 3/150 2026-10-29 23:56 by 起风了的快乐
[文学芳草园] 闲聊 +3 myrtle 2026-10-25 6/300 2026-10-29 15:28 by myrtle
[考博] 申博求助 20+3 Katrinae 2026-10-26 4/200 2026-10-27 09:56 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭