应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 各位用自己设计的引物PCR用的体系都是着么样的呢
111/2返回列表12下一页
查看: 1496  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qaz139687

新虫 (小有名气)

[求助] 各位用自己设计的引物PCR用的体系都是着么样的呢 已有3人参与

我的体系是  模板cDNA2ul
                   上引物1ul
                   下引物1ul
                  Mg离子2.5ul
                 dNTP0.5ul
                 taq酶0.3ul
               dh2o17.7ul
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-26 10:04:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jackie.z

新虫 (初入文坛)
★
qaz139687(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-29 09:03:29
体积没有固定模板的，模板一般用100ng（多或少一点点影响不大），引物1ul的话浓度需要是10nmol，你这里用的酶和dNTP/Mg+都足够了，其它影响不是太大
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-10-28 00:17:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-26 18:08:27
咋没BuFFEr？确定是这样的吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-26 16:07:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cnzpli

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
2*mix10ul
引物0.5
模板100ng
水补足20

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-26 18:52:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qaz139687

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cnzpli at 2014-10-26 18:52:38
2*mix10ul
引物0.5
模板100ng
水补足20

你这是什么看不懂。。之前在一篇文章上看到是CDNA1ul  Mg离子2ul  dNTP1.6ul  上下引物各1ul  Taq酶0.4ul  加水补到20ul   这些差一点的有什么影响吗
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-27 20:26:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cnzpli

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by qaz139687 at 2014-10-27 20:26:51
你这是什么看不懂。。之前在一篇文章上看到是CDNA1ul  Mg离子2ul  dNTP1.6ul  上下引物各1ul  Taq酶0.4ul  加水补到20ul   这些差一点的有什么影响吗...

加多少不是看体积的 不同浓度体积肯定不一样 引物是10nmol cdna是100ng 镁离子和dntp按你说的加

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2014-10-27 20:56:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cnzpli

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cnzpli at 2014-10-27 20:56:55
加多少不是看体积的 不同浓度体积肯定不一样 引物是10nmol cdna是100ng 镁离子和dntp按你说的加
...

mmol 打错了

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
6楼2014-10-27 20:58:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qaz139687

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by jackie.z at 2014-10-28 00:17:36
体积没有固定模板的，模板一般用100ng（多或少一点点影响不大），引物1ul的话浓度需要是10nmol，你这里用的酶和dNTP/Mg+都足够了，其它影响不是太大

模板100ng着么算的呀  还有引物1ul需要10nmol
赞一下 回复此楼
8楼2014-10-28 15:42:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流氓一个

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
qaz139687: 金币+1 2014-10-31 12:23:56
20微升体系：
ddH2O 13.5
Buffer 2
dNTP 1
引物1 1
引物2 1
模板 1
酶 0.5
赞一下 回复此楼
我有我人生
9楼2014-10-30 15:20:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qaz139687

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 流氓一个 at 2014-10-30 15:20:44
20微升体系：
ddH2O 13.5
Buffer 2
dNTP 1
引物1 1
引物2 1
模板 1
酶 0.5

你做的是什么物种的  我之前用这个体系跑了下 发现跑出来的条带非常弱
赞一下 回复此楼
10楼2014-10-31 12:25:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qaz139687 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 269专硕求调剂 +5 金恩贝 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:37 by zhyzzh
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +6 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-21 17:21 by 学员8dgXkO
[考研] 298求调剂 +4 上岸6666@ 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:14 by 学员8dgXkO
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭