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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 考马斯亮蓝测定大豆分离蛋白的含量
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ly476779208

银虫 (初入文坛)

[求助] 考马斯亮蓝测定大豆分离蛋白的含量 已有2人参与

我用BSA做出的标准曲线，R^2=0.997。（但是并没有加入0点，加入0点之后就变成0.985了= = ）
然后，取了0.5g的大豆分离蛋白（SPI）溶于50mL的PBS（ph=7），得到1%即10mg/mL的SPI溶液，均质。
方法：待测液1mL+考马斯亮蓝5mL，反应5min后，在595nm处测定吸光度。
稀释10倍，100倍后测定吸光度，通过标准曲线得出原液浓度为1mg/mL，空白是PBS。
求助：这个溶解度为什么会这么小，是因为测定方法中有问题还是SPI溶解度本来就小？

1.担心是考马斯亮蓝变质，但是重新配置考马斯亮蓝之后再测定，还是这么多。
2.SPI是离心后取的上清液，好澄清……
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做实验哦QAQ
1楼 2014-10-23 15:34:48
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ly476779208

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 天狼2013 at 2014-10-29 17:51:55
你的大豆分离蛋白是买的还是自己提的？低温脱脂豆粕中自己提的溶解度才高，买的都是变性的，溶解度不高的。

是实验室买的……好吧QAQ，谢谢
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做实验哦QAQ
5楼2014-10-30 11:15:02
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winterb

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大豆分离蛋白（SPI）是大豆分离蛋白乳液,可溶性蛋白很少.
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2楼2014-10-24 08:04:34
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ly476779208

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by winterb at 2014-10-24 08:04:34
大豆分离蛋白（SPI）是大豆分离蛋白乳液,可溶性蛋白很少.

在50ml的pbs里面，10mg的SPI只溶解了1mg算正常吗？
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做实验哦QAQ
3楼2014-10-24 09:58:42
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天狼2013

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的大豆分离蛋白是买的还是自己提的？低温脱脂豆粕中自己提的溶解度才高，买的都是变性的，溶解度不高的。
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4楼2014-10-29 17:51:55
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