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ly476779208

银虫 (初入文坛)

[求助] 考马斯亮蓝测定大豆分离蛋白的含量 已有2人参与

我用BSA做出的标准曲线,R^2=0.997。(但是并没有加入0点,加入0点之后就变成0.985了= = )
然后,取了0.5g的大豆分离蛋白(SPI)溶于50mL的PBS(ph=7),得到1%即10mg/mL的SPI溶液,均质。
方法:待测液1mL+考马斯亮蓝5mL,反应5min后,在595nm处测定吸光度。
稀释10倍,100倍后测定吸光度,通过标准曲线得出原液浓度为1mg/mL,空白是PBS。
求助:这个溶解度为什么会这么小,是因为测定方法中有问题还是SPI溶解度本来就小?

1.担心是考马斯亮蓝变质,但是重新配置考马斯亮蓝之后再测定,还是这么多。
2.SPI是离心后取的上清液,好澄清……
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做实验哦QAQ
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ly476779208

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by winterb at 2014-10-24 08:04:34
大豆分离蛋白(SPI)是大豆分离蛋白乳液,可溶性蛋白很少.

在50ml的pbs里面,10mg的SPI只溶解了1mg算正常吗?
做实验哦QAQ
3楼2014-10-24 09:58:42
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winterb

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
大豆分离蛋白(SPI)是大豆分离蛋白乳液,可溶性蛋白很少.
2楼2014-10-24 08:04:34
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天狼2013

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的大豆分离蛋白是买的还是自己提的?低温脱脂豆粕中自己提的溶解度才高,买的都是变性的,溶解度不高的。
4楼2014-10-29 17:51:55
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ly476779208

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 天狼2013 at 2014-10-29 17:51:55
你的大豆分离蛋白是买的还是自己提的?低温脱脂豆粕中自己提的溶解度才高,买的都是变性的,溶解度不高的。

是实验室买的……好吧QAQ,谢谢
做实验哦QAQ
5楼2014-10-30 11:15:02
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