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沙洲飘雪

新虫 (初入文坛)

[求助] A549细胞转染求助转染求助 已有2人参与

一张是我做的转染图片，请问能不能估计下转染效率啊？另外一张是我转染效果很差的一张白光图，请问为什么一个孔里细胞形态差异这么大？上半部分是怎么了？

A549细胞转染求助转染求助
A-1-O-5.jpg


A549细胞转染求助转染求助-1
A-4-W-2.jpg
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做最好的自己
1楼 2014-10-03 17:27:09
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Colin_z

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也不清楚，给你点人气

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一条路从黑走到明
2楼2014-10-03 21:39:08
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guanliu

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
沙洲飘雪(红舟流星代发): 金币+10, 代扣代发金币 2015-02-27 21:46:31
应该是干死的细胞，可能是楼主在换液或加样的时候将培养皿倾斜太久，导致细胞干死。
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3楼2014-10-07 11:00:26
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西湖鸟

新虫 (初入文坛)
可能是铺板不均导致的，这个效率目测50%左右吧，白光下的上班部分应该是死亡细胞，形态都变了。A549细胞可以用RFect小核酸转染试剂，有国际专利的，转染效率可以做到90%以上，而且细胞死的也比较少。
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4楼2018-09-30 15:17:16
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)
楼主的这个问题应该是铺板不均匀导致了细胞的坏死，看荧光只能作为参考，最好还是用48h后qPCR检测或者72h后蛋白水平检测。我们课题组在做完RFect 转染后都用48h后qPCR水平检测。
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5楼2019-03-26 15:20:22
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)
A549算是比较好转的细胞了，我们从合成公司买了siRNA,BIODAI 转染的A549细胞，转染效率差不多有90%，整个过程没有换培养液。楼主用的什么转染试剂，就算用Lipo系列对细胞毒性略大的，应该也不会这样啊
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6楼2019-05-29 08:55:29
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