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sjgg1031

铁虫 (小有名气)

[交流] 细胞转染，有许多孔的细胞死了，什么原因？

heck293细胞，铺完板后，一共七快24孔板。发现有两块板的其中两个孔变黄，然后用lipo2000转染质粒（质粒浓度1600ng/ul）后细胞，溶液没有变黄。（一般正常情况下都会变黄）没变黄的孔里的细胞都没了。。。什么原因呢
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1楼 2012-03-15 18:28:44
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丑牛1973

银虫 (初入文坛)
★
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我也做转染，72小时检测，带荧光的细胞都是死细胞
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2楼2012-04-13 10:04:47
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采英姿

银虫 (初入文坛)
★
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应该是你转染时有细菌污染了，仔细看应该有很多黑点点
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3楼2013-09-10 06:20:24
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采英姿

银虫 (初入文坛)
★ ★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-10 08:43:38
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2楼: Originally posted by 丑牛1973 at 2012-04-12 19:04:47
我也做转染，72小时检测，带荧光的细胞都是死细胞

估计你等的时间太长，细胞太密。或者你可以考虑在转染4到6小时后换medium。另外也有可能是细胞养的时间太长，一般用两个月左右就要换新的了
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4楼2013-09-10 06:22:54
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sc5921041

木虫 (著名写手)
★
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lipo对细胞有毒性 别加多了
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5楼2013-09-10 12:26:19
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尚艳楠

铁虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by 采英姿 at 2013-09-10 06:22:54
估计你等的时间太长，细胞太密。或者你可以考虑在转染4到6小时后换medium。另外也有可能是细胞养的时间太长，一般用两个月左右就要换新的了...

，我转染的细胞是marc-145，（非洲猴绿肾细胞）目的片段质粒在脂质体的帮助下，转染进入了细胞，看到荧光很强，但是我不要瞬转的细胞，为了建立稳定的细胞株，我利用G418筛选，结果筛选时荧光不不断的减弱，细胞也状态特别差，据说筛1个月左右才可以建立稳定的细胞株，我没有筛到1个月，细胞就会挂了，全军覆没。求助，请高人指点，希望可以得到高效稳定的筛选细胞的武功秘籍。不胜感激。
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6楼2014-10-28 20:31:30
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夏至1990

金虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
6楼: Originally posted by 尚艳楠 at 2014-10-28 20:31:30
，我转染的细胞是marc-145，（非洲猴绿肾细胞）目的片段质粒在脂质体的帮助下，转染进入了细胞，看到荧光很强，但是我不要瞬转的细胞，为了建立稳定的细胞株，我利用G418筛选，结果筛选时荧光不不断的减弱，细胞也 ...

我最近也在建立细胞系，也是这种情况，相互交流吧1016902450
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7楼2014-10-29 11:34:57
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niu_niu123

新虫 (初入文坛)
★
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请问找着原因了吗，我的细胞也是转染到六孔板48小时后有几个孔都死了。不知道什么原因，】
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8楼2015-03-15 15:18:12
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爱家家0220

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by niu_niu123 at 2015-03-15 15:18:12
请问找着原因了吗，我的细胞也是转染到六孔板48小时后有几个孔都死了。不知道什么原因，】

我的细胞没死，但是一直没有干扰掉
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9楼2015-04-17 18:10:56
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)
★
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应该是细胞被细菌污染了
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10楼2016-07-24 11:34:29
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