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sjgg1031

铁虫 (小有名气)

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[交流] 细胞转染，有许多孔的细胞死了，什么原因？

heck293细胞，铺完板后，一共七快24孔板。发现有两块板的其中两个孔变黄，然后用lipo2000转染质粒（质粒浓度1600ng/ul）后细胞，溶液没有变黄。（一般正常情况下都会变黄）没变黄的孔里的细胞都没了。。。什么原因呢

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1楼 2012-03-15 18:28:44

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尚艳楠

铁虫 (正式写手)

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引用回帖:

4楼: Originally posted by 采英姿 at 2013-09-10 06:22:54
估计你等的时间太长，细胞太密。或者你可以考虑在转染4到6小时后换medium。另外也有可能是细胞养的时间太长，一般用两个月左右就要换新的了...

，我转染的细胞是marc-145，（非洲猴绿肾细胞）目的片段质粒在脂质体的帮助下，转染进入了细胞，看到荧光很强，但是我不要瞬转的细胞，为了建立稳定的细胞株，我利用G418筛选，结果筛选时荧光不不断的减弱，细胞也状态特别差，据说筛1个月左右才可以建立稳定的细胞株，我没有筛到1个月，细胞就会挂了，全军覆没。求助，请高人指点，希望可以得到高效稳定的筛选细胞的武功秘籍。不胜感激。