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颜瑜逐月

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] U251细胞的转染 已有1人参与

需要将pGL4质粒转到U251细胞中,最近实验室中用lipo2000做的转染效果都不太好,请问有比lipo2000更有效的转染试剂吗?对细胞毒性怎样?
拜托了~~~
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元知造物心腸別,老卻英雄似等閒。
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lqw12406

木虫 (初入文坛)

以前我们实验室用的是TransIT-LT1 Transfection Reagent,效果比lipo 2000好多了,毒性几乎没有,可以试一试。

我前几个月从公司买了一株人脑胶质瘤U251细胞,当时接收的时候很好,就连续养了几代,冻存了2批,由于实验暂时没有开展,就把养着的细胞处理了,现在从液氮罐中复苏该细胞,都没有成活(2批都没有),打电话给公司说是冻存问题(我以前的细胞冻存都是按照4℃,-80℃,液氮),需要付钱再购买,但是不敢和老板讲,现在心急如焚,看楼主在养U251细胞,能否好心赠送一株,或者交换也行,我这有Hep G2,Hep 3B,Smmc-7211,SW480,293T,雪旺细胞等,非常感谢!!
我也在做U251细胞,听说不好转染,我正在构建慢病毒包装质粒,准备做慢病毒转染。
2楼2014-05-16 14:23:31
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junboliang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
颜瑜逐月: 金币+5 2014-05-17 20:03:31
颜瑜逐月: 金币+5 2014-05-17 20:04:46
建议用慢病毒感染,该细胞转染效率不高。
3楼2014-05-17 17:52:48
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颜瑜逐月

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lqw12406 at 2014-05-16 14:23:31
以前我们实验室用的是TransIT-LT1 Transfection Reagent,效果比lipo 2000好多了,毒性几乎没有,可以试一试。

我前几个月从公司买了一株人脑胶质瘤U251细胞,当时接收的时候很好,就连续养了几代,冻存了2批,由 ...

额,我现在不做细胞了,因为结果不理想,所以改做菌了,U251细胞是跟师兄借的,自己并没有养,所以帮不了兄台了,非常抱歉!兄台问问其他虫友吧,总有养的,祝兄台好运!
元知造物心腸別,老卻英雄似等閒。
4楼2014-05-17 20:02:53
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颜瑜逐月

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lqw12406 at 2014-05-16 14:23:31
以前我们实验室用的是TransIT-LT1 Transfection Reagent,效果比lipo 2000好多了,毒性几乎没有,可以试一试。

我前几个月从公司买了一株人脑胶质瘤U251细胞,当时接收的时候很好,就连续养了几代,冻存了2批,由 ...

还是谢谢兄台给出建议!
元知造物心腸別,老卻英雄似等閒。
5楼2014-05-17 20:04:34
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颜瑜逐月

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lqw12406 at 2014-05-16 14:23:31
以前我们实验室用的是TransIT-LT1 Transfection Reagent,效果比lipo 2000好多了,毒性几乎没有,可以试一试。

我前几个月从公司买了一株人脑胶质瘤U251细胞,当时接收的时候很好,就连续养了几代,冻存了2批,由 ...

额,我现在不做细胞了,因为结果不理想,所以改做菌了,U251细胞是跟师兄借的,自己并没有养,所以帮不了兄台了,非常抱歉!兄台问问其他虫友吧,总有养的,祝兄台好运!
元知造物心腸別,老卻英雄似等閒。
6楼2014-05-17 20:04:48
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ysk1989

新虫 (小有名气)


建议用英格恩生物的转染试剂,纳米聚合物材料,细胞毒性低,转染效率高,远远超越脂质体。我们实验室之前用的是lipo2000,但感觉细胞毒性大,效果不好,还挺贵。后来就换成了英格恩生物的,感觉确实不错。
7楼2016-08-08 14:11:54
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